目的建立能同时测定人血清中维生素A(VA)、维生素D3(VD3)、维生素E(VE)和β-胡萝卜素的高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法。方法以无水乙醇沉淀蛋白质后,血清中的脂溶性维生素用乙醚/石油醚混合溶液提取,吹氮浓缩后用HPLC测定。结果VA、VD3、VE和β-胡萝卜素的线性范围分别为0.012μg/mL~500μg/mL、0.030μg/mL~500μg/mL、0.12μg/mL~500μg/mL和0.015μg/mL~500μg/mL;检出限分别为0.012μg/mL、0.030μg/mL、0.12μg/mL和0.015μg/mL;相对标准偏差分别为0.75%、0.54%、2.06%和2.74%。血清样品中VA、VD3、VE和β-胡萝卜素的回收率分别为:92%~116%,98%~112%,84.8%~106%和90%~105%。结论本法简便快速,适于血清样品中4种脂溶性维生素的同时测定。