人胃癌癌变相关蛋白分子的筛选

来源 :南华大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:glx19891006
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目的:胃癌是多种癌基因抑癌基因参与、多阶段多途径协同作用,使得胃粘膜逐步发展到癌前病变再发展到胃癌的一个演变过程。国内外也已开展了许多与这一演变过程相关的研究,但是这些研究多数是从某个或某几个基因出发。另外,这些研究多集中在DNA和RNA水平,由于基因转录和翻译水平的复杂性,DNA和RNA水平的变化并不能完全反映蛋白质水平的变化。蛋白质是生理功能的执行分子,为了了解细胞如何运作,必需知道细胞中哪些蛋白质表达,它们如何相互作用。本研究采用比较蛋白质组学的方法,分析并鉴定在正常胃粘膜上皮、异型增生胃粘膜上皮和胃癌组织中差异表达的蛋白质,以期找出胃癌癌变相关蛋白质。 方法:本研究应用双向凝胶电泳技术(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)分别分离正常胃粘膜、异型增生胃粘膜、胃癌组织的总蛋白质,经改进的胶体考马斯亮蓝染色、图像扫描、PDquest软件分析识别三者表达差异的蛋白质点,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)分析得到肽质量指纹图谱(peptide mass fingerprint,PMF),再经Mascot软件搜索SWISS-PROT和NCBI蛋白质数据库鉴定蛋白质,并利用生物信息学资源对所鉴定蛋白质的功能和亚细胞定位等进行分析。 结果:本研究通过比较正常胃粘膜、异型增生胃粘膜、胃癌组织双向凝胶电泳图谱的差异,发现了43个差异表达蛋白点,并鉴定其中11个差异表达蛋白点。11个差异表达蛋白点按其功能分为五大类:氧化还原状态调节蛋白,过氧化氧化还原蛋白5、黄曲霉素B1乙醛还原酶、短链酰基-辅酶A脱氢酶、细胞色素C氧化酶多肽Va、细胞色素C
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