狂犬病是一种人畜共患的恶性传染病，其病原体为狂犬病毒(Rabiesvirus，RV)。狂犬病毒属于弹状病毒科(Rhabdoviridae)狂犬病毒属(Lyssavirus)，可以引起人和多种动物致死性中枢神经系统感染。 狂犬病毒的糖蛋白(Glycoprotein，GP)和核蛋白(Nucleoprotein，NP)是主要的保护性抗原，可刺激机体体液免疫及细胞免疫。狂犬病毒的GP是一种跨膜蛋白，构成病毒表面的纤突，是病毒的主要表面抗原，也是病毒与细胞膜上受体结合的物质，在体液免疫中起主要作用，且GP是唯一产生狂犬病毒中和抗体的抗原，在狂犬病毒致病与免疫中起着关键作用。NP在病毒RNA的转录和复制过程中扮演重要角色，是狂犬病毒刺激机体T细胞产生细胞免疫的主要抗原，NP还能抑制病毒在细胞间的传播和细胞内的复制，其抗原性较稳定，各毒株间差异甚少，目前常用于狂犬病毒的分类。有报道认为NP能诱导功能性B细胞和Th细胞，NP诱导的细胞免疫在狂犬病毒感染后起主要作用。NP在狂犬病毒复制过程中与基因组RNA紧密结合形成核糖核蛋白(ribonucleoprotein，RNP)，保护核酸免遭核酸酶的破坏。故构建同时表达糖蛋白和核蛋白的双表达质粒，对基因工程狂犬疫苗的研究有重要意义。 本实验通过从aG株感染的Vero细胞上清液中提取狂犬病毒RNA，用RT-PCR方法从病毒基因组中得到完整的GP和NP基因，分别将GP和NP基因克隆到pIRES载体上，获得同时含有狂犬病毒aG株NP基因和GP基因的双表达重组质粒pIRES-NP-GP，并以脂质体介导法转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO-K1细胞)，G418筛选出抗性32个克隆，通过ELISA筛选到7个高表达细胞株，采用免疫荧光、SDS-PAGE及Westernblot等方法均可检测到NP和GP蛋白的表达。