目的:对西宁市一原发性开角型青光眼(primary open angle glaucoma,POAG)家系进行Myocilin(MYCO)基因单核苷酸多态性分析研究,检测该基因外显子3(exon 3)的突变情况。方法:1、对原发性开角型青光眼患者及其亲属和正常人进行系统眼压、视力、眼底、视野及房角等眼科检查。2、全基因组DNA提取:取青光眼患者以及其亲属和正常人外周血,采用DNA分离试剂盒提取。提取的DNA经分光光度计和琼脂糖凝胶电泳鉴定。3、MYCO基因exon 3区域的扩增:根据MYCO基因exon 3序列合成3对特异性引物,以全基因组DNA为模板,应用聚合酶链反应法进行扩增。4、PCR产物的鉴定:琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物。5、PCR产物的纯化:扩增产物用QIAquick Gel Kit凝胶回收试剂盒进行纯化。6、将纯化后的产物直接进行基因测序和单核苷酸多态性分析。结果:经检测在该原发性开角型青光眼家系中发现,所有的青光眼患者和可疑者的MYCO基因exon 3区域检出Pro370Leu位点的突变,即MYCO蛋白第370位氨基酸由脯氨酸(Pro)变为亮氨酸(Leu)。正常对照的10例中未发现。结论:该青光眼家系患者中检出MYCO基因exon 3区域1个突变位点,造成MYCO蛋白第370位氨基酸由脯氨酸(Pro)变为亮氨酸(Leu),此单核苷酸多态性变化造成了MYCO蛋白的结构及功能发生改变,这可能是导致该家系原发性开角型青光眼发病的一个重要因素。研究通过提取外周血DNA,并进行PCR反应扩增MYCO基因的第三外显子,经单核苷酸多态性分析研究其突变情况,确定青光眼的发病状况,方法快捷灵敏可靠,可作为青光眼病人筛选的基本方法之一。