巴戟天多糖对实验性精索静脉曲张大鼠睾丸支持细胞FSHR表达的影响

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【目的】探讨不同浓度的巴戟天多糖对手术所致精索静脉曲张成年雄性SD大鼠睾丸生精功能的影响。【方法】75只健康青春期雄性SD大鼠随机分为VC给生理盐水组(VC模型组)、假手术组(正常组)、VC模型给巴戟天多糖200mg/kg组、VC模型给巴戟天多糖300mg/kg组、VC模型给巴戟天多糖400mg/kg组。结扎后常规1个月,灌胃治疗4周,观察各组大鼠体重,睾丸指数和附睾指数,HE染色光镜下观察睾丸组织,免疫组化法观察Sertoli细胞中FSHR的定位,QPCR测定睾丸组织中FSHR m RNA的表达水平,Western blot法检测FSHR蛋白的表达水平。【结果】1、实验前每两组之间体重均无统计学差异(p>0.05),大鼠灌胃治疗后,每两组之间体重均无统计学差异(p>0.05)。2、睾丸指数(双侧睾丸重g/体重g):VC模型组与假手术组比较,假手术组睾丸指数显著增加,存在统计学差异(P<0.05);三个VC模型给巴戟天多糖组与VC模型组相比较,三个VC模型给巴戟天多糖组显著增加,存在统计学差异(P<0.05)。附睾指数(双侧附睾重g/体重g):VC模型组与假手术组比较,假手术组附睾指数显著增加,存在统计学差异(P<0.05);三个VC模型给巴戟天多糖组与VC模型组比较,三个VC模型给巴戟天多糖组显著增加,存在统计学差异(P<0.05)。3、睾丸形态学观察:在VC模型组,生精小管在镜下可见,管壁明显变薄,各级生精细胞排列紊乱,层次模糊不清,管腔中较少见到精子细胞和精子,并可见脱落坏死的生精细胞;VC模型给巴戟天多糖200mg/kg组、VC模型给巴戟天多糖300mg/kg组、VC模型给巴戟天多糖400mg/kg组,镜下可见,生精小管管径变粗、生精上皮变厚、从精原细胞到精子细胞各级细胞、数量增多、排列紧密、层次分明,腔内脱落坏死细胞减少,随给药浓度升高,腔内精子数量逐渐增多,但没有恢复到正常水平。4、免疫组织化学:从免疫组化结果中观察,Sertoli细胞镶嵌于睾丸生精小管中,FSHR主要在其胞质中表达,显棕褐色。5、QPCR检测FSHR m RNA结果显示:VC给巴戟天多糖200mg/kg组、VC给巴戟天多糖300mg/kg组、VC给巴戟天多糖400mg/kg组与VC模型组相比较,治疗组表达水平显著增加,存在统计学差异(P<0.05),其中VC给巴戟天多糖300mg/kg组FSHR m RNA表达最高。6、Western-bolt检测FSHR蛋白表达显示:VC给巴戟天多糖200mg/kg组、VC给巴戟天多糖300mg/kg组、VC给巴戟天多糖400mg/kg组与VC模型组相比较,治疗组表达水平显著增加,存在统计学差异(P<0.05),其中VC给巴戟天多糖300mg/kg组FSHR蛋白表达最高。【结论】实验结果中,三个治疗组支持细胞上FSHR m RNA及FSHR蛋白表达水平同时提高、睾丸指数与附睾指数显著增加、生精上皮结构得到修复,提示巴戟天多糖能改善支持细胞结构,调节其功能,促进精子的发生成熟,进而修复大鼠睾丸生精功能。
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