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正确的基因组印记(genomic imprinting)对哺乳动物个体的发育非常重要,而DNA甲基转移酶Dnmtl是维持哺乳动物基因组印记最重要的酶。Dnmtl基因转录的mRNA存在两种形式,即体细胞特异表达的Dnmtls和卵母细胞特异表达的Dnmtlo。前人曾经以几十枚胚胎为模板,通过RT-PCR技术发现该基因在动物胚胎发育早期即开始表达。本论文在此基础上,以小鼠为材料,将模板量降至单枚卵母细胞或胚胎,在优化PCR的各种条件后,以期建立正常胚胎Dnmtl基因的标准转录模式。实验同时分析了Dnmtl与持家基因hprt的转录,结果发现,Dnmtls的转录本不仅存在于卵母细胞(15h-post hCG)中,而且胚胎从原核到囊胚(118h-post hCG)的各个发育过程中,一直存在该类型的转录本,依次为卵母细胞100%(10/10)、原核甲期(20h-post hCG)30%(3/10)、原核晚期(30h-post hCG)20%(2/10)、2-C早期(35h-post hCG)70%(7/10),从2-C晚期(50h-post hCG)开始,包括4-C(65h-post hCG)、8-C(75h-post hCG)、桑椹胚阶段(93h-post hCG),直至囊胚阶段均为100%(10/10);而Dnmtlo转录本仅存在于卵母细胞(100%,10/10)、原核早期(90%,9/10)和原核晚期(40%,4/10)胚胎中;hprt转录本在所检测的各阶段细胞或胚胎中均100%(10/10)存在。以10枚卵母细胞或胚胎为模板时发现,Dnmtls转录本的量从卵母细胞到原核早期逐渐减少,这种低水平一直维持到原核晚期,从2-C早期开始有所回升,并在之后的发育过程中保持增加的趋势;而Dnmtlo的转录本则仅存在于卵母细胞、原核早期和原核晚期的胚胎中,且水平呈下降趋势。结果表明卵母细胞中生成的Dnmtls转录本在受精后迅速降解,胚胎基因组从2-c早期开始转录Dnmtls;而卵母细胞中生成的Dnmtlo mRNA在受精后以较慢的速度降解,胚胎基因组不再转录Dnmtlo。本实验通过建立Dnmtl在正常小鼠胚胎发生过程中的转录模式对不通过巢式PCR等特殊途径而检测微量模板的方法进行了有益的尝试,对于今后其他相关的检测或研究具有一定参考意义。