【摘 要】
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目前在工业化的国家,心血管病的发病率和死亡率均很高,若能对此类疾病患者进行早期诊断和及时治疗,定能挽救很多人的生命,其中早期诊断是关键.病情的诊断包括临床表现,心电图
【出 处】
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中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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目前在工业化的国家,心血管病的发病率和死亡率均很高,若能对此类疾病患者进行早期诊断和及时治疗,定能挽救很多人的生命,其中早期诊断是关键.病情的诊断包括临床表现,心电图的变化和实验室指标的检测,而实验室检查尤其重要.实验室检查是否有利于早期诊断主要取决于两方面因素:一是有无特异的心肌损伤标志物,二是有无较快得出结果的检测方法.目前研究认为心肌损伤的特异生化标志物主要有心肌肌钙蛋白T(cTnT),心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)和肌红蛋白(Mb)等,它们对于缺血性心脏病与心肌损伤具有重要的诊断价值,有取代心肌酶学指标的趋势.在这些生化指标中,心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)尤为突出,它是心脏特异性蛋白之一,作为心肌损伤的一种特异、灵敏的血清标志物.本研究采用生物化学的方法和手段,从猝死者心肌中提取纯化cTnI抗原,共获得纯化cTnI抗原13.1mg,经鉴定其纯度和免疫学活性均达到后续实验的要求.在此基础上我们用自行研制的cTnI作为抗原,免疫BALB/c小鼠,根据经典的单克隆抗体制备技术,用SP<,2>/0细胞与免疫小鼠的脾细胞进行细胞融合;采用酶联免疫吸附试验(ELISA方法)对融合细胞进行cTnI抗体检测,采用有限稀释法将筛选到的阳性杂交瘤细胞进行克隆化培养,上述实验均获得了较为满意的结果.此外,本实验还对所获结果进行了较为深入的探讨,为cTnI的胶体金免疫层析法、酶免法的建立以及国产化cTnI临床检测试剂盒的研制奠定了较为扎实的实验基础.
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