金针菇子实体中小分子化合物的分离纯化与药理活性研究

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本文以金针茹(Flammulina velutipes)子实体作为研究对象,对其化学成分和生物药理活性进行了详细地研究。  对金针菇子实体乙醇提取物进行萃取,得到石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇和剩余分部。利用各种柱层析技术对各分部进行了系统地分离纯化,通过核磁、质谱等波谱技术,鉴定出11个化合物,分别为:麦角甾醇(1)、顺-9-二十三烯(2)、尿嘧啶(3)、D-阿糖醇(4)、烟酰胺(5)、黄嘌呤(6)、腺苷(7)、甘油(8)、海藻糖(9)、甘露醇(10)和D-酪氨酸(11),其中化合物2、5、6、8和11是首次从金针菇了实体中分离得到的。  利用HPLC法建立了麦角硫因的分析方法,分析测定了4种不同食药用菌中的麦角硫因含量,实验结果表明:猴头菇(0.085%)>金针菇(0.079%)>草菇(0.041%)>金针菇根部(0.013%)>灰树花(0.010%)。以金针菇为对象,研究了提取方式、提取溶剂和提取时间等因素对提取物中麦角硫因含量的影响。  采用体外抗肿瘤细胞模型,考察了各萃取分部和20%乙醇提取物对不同肿瘤细胞L1210、SW620、MCF-7、K562、HepG2以及正常细胞WPMY-1增殖的抑制作用。实验发现金针菇子实体醇提物的石油醚、正丁醇和剩余水溶性分部均具有一定的抗肿瘤活性,其中石油醚分部的活性最强;氯仿和乙酸乙酯分部对正常细胞生长也有一定的抑制作用,表现出一定的细胞毒作用。  采用荧光底物检测法,研究各萃取分部和化合物对DPP-Ⅳ活性的抑制作用。结果显示5个萃取分部对DPP-Ⅳ活性的抑制作用为:乙酸乙酯分部>氯仿分部>石油醚分部>剩余水溶性分部>正丁醇分部;高浓度作用(0.2 mg/mL)化合物海藻糖和烟酰胺的作用效果较好,其中海藻糖对DPP-Ⅳ活性的抑制率最高达到33.9%;低浓度(0.05mg/mL)作用化合物中麦角甾醇和9-二十三烯的抑制效果较好,其最高抑制率均超过了20%。
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