褐藻胶寡糖的海洋性微生物发酵

来源 :华南理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nimashabi2009
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本文利用海洋性微生物发酵褐藻胶制备褐藻胶寡糖。对发酵培养基组分及发酵条件进行了优化,并确定了在发酵罐发酵阶段控制pH为恒定值能获得更高的产物浓度。将发酵扩大到5L和50 L,通过产物及菌体浓度变化比较摇瓶发酵与两种发酵罐发酵效果。获得了该菌株发酵有价值的信息,为今后进一步开展该菌株的发酵奠定了理论基础。在此基础上提取了发酵液中酶,并进行了初步的分离纯化。   1.发酵条件优化   通过单因子试验和正交试验,在摇瓶发酵阶段对菌株的碳源、氮源、盐度、无机盐、pH、接种量等发酵条件进行了优化,得到了发酵最佳培养基成本和最适发酵条件。培养基组成:碳源褐藻酸钠6 g/L、氮源(NH4)2SO47g/L、无机盐K2HPO47 g/L、NaCl25 g/L、葡萄糖0-1 g/L、硫酸亚铁0.1 g/L;培养条件:起始pH值7.4、接种量15%、培养时间24 h、摇瓶转速180 rpm、装液量20 mL/50 mL。   2.种子菌的逐级别放大培养   按照种子菌生长的曲线绘制标准曲线,按照标准曲线上对应的最大菌体浓度及吸光值时刻接种,结果显示菌株在发酵罐和摇瓶培养的生长曲线前两个周期基本相同,在发酵罐中(18-24 h)菌株生长稳定期不如摇瓶(18-27 h)培养维持时间长。   3.发酵罐发酵褐藻胶   将发酵放大到5L和50 L,扩大规模后,培养液将变得越来越不均匀。对于大型发酵罐,在反应器的某些局部区域内氧处于耗竭状态。为避免此影响,5L发酵罐通气量为2.5(V/V-min),搅拌速度为220rpm;50L发酵罐通气量为40(V/V·min),搅拌速度为250 rpm,其他条件同摇瓶发酵。比较三种发酵情况下发酵液中菌体及产物浓度变化,发现不同情况下两者变化情况基本相同,发酵罐越大,其菌体浓度最大值相对高。对于50L发酵罐而言,菌体对数期相对其他两种发酵提前,产物浓度增加比较快,但是达到最大浓度相对滞后,相对于5L发酵罐和摇瓶发酵推迟了6h。最终结果标明发酵罐发酵都达到了较高的产物浓度和菌体浓度。   3.粗酶提纯及相对分子量测定   从发酵液中提取褐藻胶裂解酶,经硫酸铵初步盐析、DEAE Sepharose Fast Flow离子交换和Sephardex G-100分子筛层析,获得SDS-PAGE为单一蛋白纯的酶液,最高纯化倍数为5.99,比活力为136.23 U/mg,测定褐藻胶裂解酶的分子量约为40kD。
其他文献
副溶血性弧菌是一种革兰氏阴性的嗜盐性食源性致病菌,隶属弧菌科中的弧菌属,广泛存在于海水、海底沉积物等环境和虾、蟹、贝类等各种海产品中。是引起沿海地区食物中毒爆发的常
在我国乃至全世界,氯霉素等抗生素在动物性食品中残留十分严重,人们长期摄入含有氯霉素的食物,会严重影响机体健康。因此,研究出能快速有效的检测氯霉素的方法具有重要意义。
现有磨料射流技术能够实现切割等作业的功用,但采用类似原理实现磨料射流及磨料浆体射流连续作业的技术仍存在设备复杂、工作中存在短暂间隔,无法保证射流的稳定性和连续性,
信息化是传统制造业的必然趋势,进入二十一世纪,传统制造业加快了信息化的进程。门座起重机作为一种典型的旋转类型起重机,被广泛的应用与港口、码头货物的机械化装卸,造船厂船舶的施工与安装及大型水电站工地的建坝工程中。对于提高劳动生产率,实现生产过程的机械化具有重要的意义。本文以浙江大学与上海港机厂合作项目“门座起重机四连杆结构分析系统”为背景,以门座起重机四连杆机构作为主要研究对象,介绍门座起重机四连杆
在许多应用场合,采用小型分离式热管是一种合理地选择。因而有必要就此作进一步深入了解,以便为实际应用提供合理依据。并用蛇形翅片管换热器作为冷凝段和蒸发段的换热器,这样可
在电厂一次采集数据的基础上,研究了能反映机组运行经济性的在线计算通用模型和目标值模型。分析了现有电厂的主要运行设备,建立了机组通用数学模型;给出了计算排汽焓的新型准确的方法;分析了系统结构改变的不稳定性,提出了解决计算问题的方法;利用模糊综合评判决策建立了机组自寻优系统;指出了端差的能损分析方法。将建立的数学模型应用到某机组性能分析平台上,运行结果达到预期效果。
本文以乳脂、全脂乳粉为原料,对脂肪酶酶解、微生物发酵、微生物发酵与酶法耦联技术制备天然奶味香基进行了研究,具体研究结果如下:   利用GC-MS、同时蒸馏萃取(SDE)+GC-MS对市
加氢反应流出物空冷器(REAC)系统属于特种设备,承受高压、临氢和腐蚀性多相流动等苛刻工况,管束泄漏、爆管等事故时有发生,严重影响企业生产和装置安全。近年来,在炼油装置大型化
2007年的中国股市,出现了快速增长的势头,并于10月16日突破了具有重要象征意义的6000点关口。中国证券投资逐渐得到更多投资者的热衷,开户数量不断创出新高,居民投资股市的狂
我国能源发展规划中提出要在“十一五”计划期间把电力工业中发电煤耗和厂用电率从原来的370g/kwh和5.9%分别降低到355g/kwh和4.5%,并对电力工业污染物排放提出了更加严格的