粉尘螨(成螨)体变应原的制备及其免疫化学分析

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制备粉尘螨(成螨)体变应原浸液,并探讨其可能的化学组成及免疫学特性.在实验室内人工培养粉尘螨,并分离出成螨,制备螨体变应原浸液;用葡萄糖凝胶柱层析洗脱液对支气管哮喘患者进行皮肤挑刺试验;用SDS-PAGE、红外线光谱、气相色谱—质谱联用仪分析所获变应原.制备出的粉尘螨浸液含氮量为32200 PNU/ml,pH值为5.0~6.0;4组小白鼠腹腔注射后,观察10天,健康状况良好,未见毒性反应.粉尘螨浸液经Sephadex G-75柱层析后,沈脱液的OD值呈现双峰,能引起皮肤红晕或风团的洗脱液主要位于两峰之间接近第1峰处;经Sephadex G-200柱层析后呈三峰,能引起皮肤红晕或风团的洗脱液主要位于两峰之间接近第二峰处.SDS-PAGE结果提示该浸液有30条以上的蛋白质条带,分子量范围为14kD~97kD.红外线光谱结果显示该变应原含-OH、-NH<,2>-、-CH<,2>、-CH<,3>、-C=O-、-C-O-C-、-COOH等官能团.气相色谱-质谱联用仪分析表明该粉尘螨变应原中含有十六(碳)烷、环己基-二甲氧基甲基硅烷、十氢4,8,8-三甲、基-9-亚甲基,-1-4-亚甲基甘菊、十六烷酸、9-十八烯酸、十八烷酸、十四烷酸、环丙烷甲酸等9种物质.可用粉尘螨(成螨)体制备变应原浸液,其含有多种有机物,具有免疫学活性的成分位于Sephadex第1峰、第2峰及两峰之间,是免疫诊断和治疗所需组分.
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