人体微生态系统由人体正常微生物群及其所在部位组织、细胞和代谢产物等微环境共同构成。阴道微生态是人体微生态系统的重要组成部分,与菌群失衡导致阴道感染性疾病的发生密切相关。阴道微环境中常见的寄生菌有:乳酸杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、无乳链球菌和肺炎克雷伯杆菌,金黄色葡萄球菌作为除乳酸杆菌之外的较常见的阴道寄生菌,其相关研究较少,而雌激素可通过促进阴道上皮细胞合成糖原增加,最终促进阴道乳酸合成,使阴道处于弱酸性环境,调节阴道菌群的平衡,但是雌激素是否能影响金黄色葡萄球菌在阴道上皮细胞的粘附定植及其作用机制尚未被报道。在本研究第一部分中,我们收集临床样本,对不同雌激素状态的女性阴道分泌物标本作金黄色葡萄球菌鉴别培养,并作阴道感染流行病学分析,发现金黄色葡萄球菌感染与雌激素水平密切相关;第二部分中,我们从细胞水平进一步研究不同浓度的雌激素对于金黄色葡萄球菌的影响,发现雌激素可以促进金黄色葡萄球菌在阴道黏膜上皮VK2/E6E7细胞的定植,并深入探索其相关作用机制。第一部分不同雌激素水平女性阴道分泌物金黄色葡萄球菌鉴别培养及阴道感染易感因素分析目的:探讨不同雌激素状态下阴道分泌物中金黄色葡萄球菌鉴别培养特性,分析其易感因素。方法:随机收取2017年01月至2017年06月于南京市妇幼保健院妇产科门诊就诊的患者阴道分泌物标本及其病例资料,共235例,育龄期组(<45岁)152例(64.68%),其中无症状组48例(31.58%),细菌性阴道病组104例(68.42%),围绝经或绝经期组(≥45岁)83例(35.32%),其中无症状组23例(27.71%),细菌性阴道病组60例(72.29%);记录社会人口统计学信息、性行为和生殖健康特征,鉴别培养阴道分泌物中金黄色葡萄球菌并计数菌落数。结果:在235例阴道分泌物标本中,无症状组71例(30.21%),细菌性阴道病组164例(69.79%)。统计结果,不仅证实了细菌性阴道病是女性高发病,而且,我们发现细菌性阴道病仅在无性生活或每年偶有性生活女性(38.89%)以及每天外阴清洁≥4次女性(40%)中发病率相对较低,围绝经或绝经期组细菌性阴道病发病率稍高于育龄期组。细菌性阴道病发病率在年龄、性生活频率、外阴清洁频率、更换内裤频率、是否喜欢穿紧身裤组具有显著差异(P值<0.05),在性伴侣数、生育史、既往生殖道感染史和学历组差异不显著(P值>0.05)。阴道分泌物金黄色葡萄球菌阳性检出率高达89%,无症状组菌落计数均在102~103 cfu/ml,细菌性阴道病组菌落计数均在104~105 cfu/ml;对于育龄期女性,无论是无症状还是细菌性阴道病组金葡菌菌落计数均高于围绝经期或绝经期组,差异具有统计学意义。结论:细菌性阴道病是女性常见病、多发病,与年龄、雌激素水平、性生活频率、性伴侣数、生育史、既往生殖道感染史、外阴清洁频率、更换内裤频率、是否喜欢穿紧身裤以及学历等因素相关,并且金黄色葡萄球菌在阴道的粘附定植与体内雌激素水平呈正相关。第二部分雌激素对金黄色葡萄球菌在阴道上皮细胞株VK2/E6E7定植的影响及其作用机制研究目的:探索17β-雌二醇对金黄色葡萄球菌在阴道上皮细胞定植的影响及其相关作用机制。方法:培养VK2/E6E7细胞和金黄色葡萄球菌,分别探索体外金黄色葡萄球菌在VK2/E6E7细胞上粘附定植与菌液作用时间、菌液浓度的关系;探索体外金黄色葡萄球菌在VK2/E6E7细胞上粘附定植与17β-雌二醇浓度的关系;进一步加入雌激素受体拮抗剂ICI 182780后,再观察17β-雌二醇对金黄色葡萄球菌在VK2/E6E7细胞上粘附定植的影响。结果:接种金黄色葡萄球菌菌液3h时,定植于VK2/E6E7细胞上的菌量最多,而雌激素受体p ERα和粘附相关蛋白p FAK表达量于接种金黄色葡萄球菌0.5h时最高;接种金黄色葡萄球菌菌液浓度为104 CFU/ml时,定植于VK2/E6E7细胞上的菌量最多,p ERα和p FAK表达量也最高;不同浓度的17β-雌二醇处理24h,用1000n M 17β-雌二醇处理时,定植于VK2/E6E7细胞上的菌量最多,此时p ERα和p FAK表达量也最高;10μM的ICI 182780处理后,定植于VK2/E6E7细胞上的菌量明显减少,而p ERα和p FAK在加入ICI 182780后表达量明显下降,差异均具有统计学意义。结论:雌激素可以促进金黄色葡萄球菌在VK2/E6E7细胞上粘附定植,可能通过调控ERα/FAK信号通路发挥作用。