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目的:通过检测IL-22(白细胞介素22)在细胞因子表达、细胞增殖功能以及屏障功能方面对HUVECs(人脐静脉内皮细胞)的影响,来探讨IL-22对血管炎发生发展的影响。方法:1.用半定量RT-PCR技术检测IL-22R1在HUVECs中的表达情况。2.实时定量PCR技术以及Western blot技术分别用于检测IL-22作用前后IL-6,IL-8,CCL2,ICAM1,VCAM1,CXCR4及CCL20等细胞因子在HUVECs中m RNA水平以及蛋白质水平的表达变化情况。3.通过CCK8实验检测不同浓度的IL-22作用前后HUVECs的增殖能力变化情况与不同浓度的LPS对HUVECs的增殖抑制情况。另外将不同浓度的IL-22作用于HUVECs预处理24h后,再将等浓度的LPS作用于细胞24h,最后用CCK8实验来检测IL-22对LPS的增殖抑制是否有对抗作用。4.用FITC标记的右旋糖酐通过HUVE单层细胞的渗透率来检测不同浓度的IL-22作用前后HUVECs的屏障功能变化情况以及不同浓度的LPS对HUVECs屏障功能的影响。另外将不同浓度的IL-22作用于HUVECs预处理24h后,再将等浓度的LPS作用于细胞24h,最后用FITC标记的右旋糖酐通过HUVE单层细胞的渗透率来检测IL-22对LPS的屏障破坏是否有对抗作用。结果:1.IL-22R1 m RNA在HUVECs中持续表达。2.IL-22作用于HUVECs后,趋化因子CCL2和CCL20的表达在m RNA水平及蛋白质水平均可见明显增加,而炎症因子IL-6及IL-8的表达则未见明显变化。3.IL-22作用于HUVECs后,HUVECs的增殖率得到显著提高。LPS可以显著抑制HUVECs的增殖率。被IL-22预处理过的HUVECs其增殖率不受LPS的抑制。4.IL-22作用于HUVECs后,HUVECs的渗透率下降,occludin的表达增强。LPS可以提高HUVECs的渗透率并降低occludin的表达。被IL-22预处理过的HUVECs其渗透率受LPS的影响减少,occludin的表达情况同单独用IL-22作用后相似。结论:1.IL-22的受体IL-22R1在HUVECS中广泛表达,表明HUVECs是IL-22作用的靶细胞之一。2.IL-22还可以提高趋化因子CCL2与CCL20的表达,却对炎症因子IL-6及IL-8的表达无明显影响,表明IL-22在炎症反应主要起到对抗炎细胞的趋化作用而非促炎作用。3.IL-22不仅可以提高HUVECs的增殖能力,还可以抑制由LPS诱导的HUVECs增殖抑制。4.IL-22不仅可以通过增强occludin的表达来提高HUVECs的屏障功能,还可以通过该机制对抗由LPS引起的HUVECs屏障功能下降。