基于Aβ靶点探讨人参皂苷防治阿尔茨海默病分子机制

来源 :长春中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhouxiancai0128
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目的:探讨人参皂苷防治阿尔茨海默病作用及机制。  方法:(1)体外实验:利用过氧化氢作用SH-SY5Y细胞,建立细胞氧化损伤模型。分为空白对照组,模型对照组,GS给药组,PDS给药组,通过MTT法检测人参皂苷对SH-SY5Y细胞存活率的影响,利用流式细胞术检测人参皂苷对SH-SY5Y细胞凋亡的影响,采用Western Blotting技术检测SH-SY5Y细胞内Bcl-2、Bax、Caspase3、Caspase9、Nr£2、HO-1、Keap1、Tau、APP、Aβ1-42蛋白的表达水平;(2)体内实验:选取ICR种小鼠,采用氢溴酸东莨胆碱(SCOP)腹腔注射建立AD模型小鼠,分为空白对照组、模型对照组、阳性给药组、GSL剂量组、GSH剂量组、PDSL剂量组、PDSH高剂量组,Morris水迷宫与跳台实验对小鼠行为学进行检测,采用SOD、MDA、GSH试剂盒检测人参皂苷对小鼠海马抗氧化的影响,HE染色观察人参皂苷对小鼠海马神经元细胞形态的影响,TUNEL染色法检测人参皂苷对小鼠海马神经元细胞凋亡的影响,采用Western Blotting技术检测小鼠神经细胞中Aβ1-42、APP、Tau、Bcl-2、Bax、Caspase3、Caspase9、Nrf2、HO-1、Keap1蛋白的表达水平,利用qPCR技术检测小鼠神经细胞中中Aβ、APP、Tau、Bcl-2、Bax、Caspase3、Caspase9、Nrf2、HO-1、Keap1基因的表达水平。  结果:(1)人参皂苷能提高过氧化氢致SH-SY5Y细胞损伤的存活率(P<0.05),抑制SH-SY5Y细胞的氧化应激与细胞凋亡(P<0.05);(2)人参皂苷能减少AD模型小鼠逃避潜伏期和逃避路程(P<0.05),人参皂苷能维持小鼠海马神经元细胞的完整性和排列紧密度,抑制核固缩,减少小鼠海马区神经元细胞的凋亡,增加其脑组织中GSH-PX和SOD的活性(P<0.05),降低脑组织中MDA的含量(P<0.05),体外与体内实验均证明人参皂苷可上调神经细胞内Nrf2、HO-1、Bcl-2蛋白的表达水平(P<0.05),下调神经细胞内Aβ1-42、 APP、Tau、Keap1、Bax、Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达水平(P<0.05)。  结论:人参皂苷可能通过促进Nrf2/HO-1信号通路的传导,上调Nrf2、HO-1、Bcl-2蛋白的表达水平,下调Aβ1-42、 APP、Tau、Keap1、Bax、Caspase-3和Caspase-9相关蛋白的表达,抑制氧化损伤和神经元细胞的凋亡,起到神经元细胞的保护作用和AD的预防作用。
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