生物毒素BtA的藕合

来源 :厦门大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zy1848
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
新型生物杀虫剂BtA藕合机理的研究,是基于生物藕合的理论,将苏云金芽孢杆菌伴胞晶体提纯,另一方面,对阿维菌素进行结构改造,用丁二酸酐对阿维菌素进行衍生化,形成带羧基的阿维菌素衍生物,最后利用氨基-羧基偶联剂(EDC)进行藕合,形成BtA单体双毒素的结构,实现两种生物毒素的结构改造和生化结合。在此基础上对BtA的杀虫机理与杀虫作用效果进行研究。   用荧光滴定法进一步对BtA的藕合条件、藕合效率、结构稳定性进行研究,荧光滴定法是研究蛋白质与小分子之间相互作用的重要手段,蛋白质由于含有酪氨酸色氨酸等基团,会使蛋白质发出荧光。随着阿维菌素与Bt晶体的藕合会使Bt晶体的构象或引起内源荧光发射的氨基酸残基的微环境发生变化,从而导致其荧光光谱的最大发射峰等的变化。由此我们可以建立Bt晶体与阿维菌素结合的荧光滴定模型,测定Bt晶体与阿维菌素藕合成BtA的结合比以及本征结合常数,结合比n=5,结合常数Kd=6.44μmol/L。   Octet RED System蛋白互相作用系统是应用专利的BLI(Bio-LayerInterferometry)技术,即生物膜层表面干涉技术进行精确检测。可以计算结合速率常数和解离速率常数等动力学常数。本论文利用Octet Red技术进行中肠蛋白与Bt晶体蛋白及藕合BtA的结合动力学研究,研究Bt晶体与藕合BtA与中肠结合活性,并对Bt与BtA的作用机理进行比较。用ELISA进行结果验证,研究结果发现藕合后的BtA与中肠受体的结合力相比Bt有所提高。   在对杀虫效果的研究中,结果发现Bt、BtA都具有很好的杀虫活性,在24小时处理后,它们对小菜蛾的LC50分别为2.1和1.6μg/mL。Bt的半致死率大于BtA,说明BtA杀虫效果更好。同时,测量虫子的体长,结果显示BtA对小菜蛾生长抑制更明显。   本论文运用蛋白组学研究Bt与BtA分别作用于小菜蛾后的代谢产物。通过双向电泳图谱的比较,找到差异较明显的蛋白点,结合质谱分析技术和数据库信息检索最终鉴定出差异蛋白Chemosensory protein CSP1蛋白,这些结果有助于分析改造后的BtA在小菜蛾体内的作用机理与原Bt蛋白不同之处。   本论文合成新型生物杀虫毒素BtA,为克服生物杀虫剂杀虫谱窄和杀虫速率慢的弱点和延缓害虫的抗药性提供技术理论,为开发新型生物农药提供新的途径。  
其他文献
  如何判断分子的反应活性位点以及形成化学键强弱,一直备受科学家们的重视。随着量子化学的发展,人们已用电子密度、电子局域函数、Fukui函数和静电势的拓扑学分析等不同理
蒙古冰草(Agropyron mongolicum Keng)即沙芦草,异花授粉,禾本科小麦族冰草属多年生牧草。蒙古冰草不仅具有重要的饲用价值,并且具有遗传和生态价值。本研究以野生蒙古冰草9个居群为材料,利用流式细胞术研究其染色体倍性,并用SSR分子标记研究蒙古冰草居群间和居群内单株间的遗传多样性。结果如下:(1)制备蒙古冰草单细胞核悬液的最佳方法为取400mg新鲜叶片剪碎加OttoⅠ分离液,经5
本文主要应用分子动力学方法在NPT和NVT系综下对不同表面活性剂的混合体系在岩石表面的吸附行为进行模拟研究.建立各种矿物和粘土模型,计算每种矿物与吸附物质在不同温度和压
会议
学生只有积极参与知识的建构过程,才能调动参与的积极性,提升他们自主学习的能力.传统教学中,教师面临升学的压力,绞尽脑汁地为学生划重点,或对学生进行大规模的训练,让学生
期刊
  High-valent iron-oxo species are implicated as key intermediates to selectively functionalize target C-H bonds in the catalytic cycles of a range of O2-acti
会议
以甲烷二氧化碳干重整为手段进行甲烷间接转化,因兼具环境保护、解决能源问题以及资源综合利用的多重意义而备受关注。近年来Ni-Co双金属甲烷二氧化碳重整催化剂凭借其可调变的电子和几何结构、双金属之间的协同作用以及金属合金的生成等优势成为研究热点。本论文以提高催化剂的活性为前提,进一步减少催化剂的积碳量。主要对比了单双金属催化剂之间的不同、不同质量分数和不同种类助剂的影响,并对催化剂的制备方法进行了改进
  The binding modes of urokinase-type plasminogen activator(uPA)with five inhibitors(1-(7-Sulfonamidoisoquinolinyl)guanidine derivatives)were predicted based
会议
稀土掺杂的上转换发光材料由于在生物以及材料领域潜在的应用前景而得到了广泛的研究,尤其是三维立体显示器开启了上转换发光材料应用的新时代,合成透明的聚合物基的上转换复
集胞藻PCC6803的基因组测序已经完成,并且对其基因功能的研究也取得了很大的进展,但是该藻种中仍然存在着许多未知的功能基因。为了研究未知功能基因,本实验室构建了集胞藻PCC68
  Uranium is the most important fuel in the nuclear reactor.With the increase of demand for uranium in nuclear plants,many efforts havebeen made to search for
会议