论文部分内容阅读
目的：探讨在中国四川省泸州市汉族人群中，survivin基因启动子区-31G/C、-141G/C、-241T/C单核苷酸多态性位点(SNPs)多态性与结直肠癌易感性，以及与结直肠癌患者临床病理相关参数间的相关性；研究分析-31G/C多态性与结直肠癌患者耐药相关标记的关系。方法：随机选取2009-2012年四川省泸州医学院附属医院206例汉族结直肠癌患者作为病例组和相似年龄性别构成的129例健康汉族人作为对照组，抽取外周静脉血，使用酚-氯仿-异戊醇法提取基因组DNA，采用PCR技术扩增目的基因片段，利用限制性片段长度多态性（restriction fragment length polymorphism,RFLP）、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳以及银染技术分别确定survivin基因启动子-31G/C、-141G/C、-241T/C位点基因型。详细收集结直肠癌患者临床病理资料（肿瘤部位、大体类型、组织学类型、分化程度、浸润深度、淋巴结转移情况）；收集病例组结直肠癌肿瘤组织，免疫组化技术检测肿瘤组织中耐药相关标记的表达。采用二项分布统计分析泸州地区汉族人群中survivin基因启动子-31G/C、-241T/C多态性位点基因型频率分布与NCBI数据库公布全球数据间的差异；采用卡方检验分析SNPs多态性与结直肠癌的相关性及与肿瘤临床病理学参数的关系；采用秩和检验分析-31G/C不同基因型与肿瘤耐药相关标记物的关系；所有分析均采用SPSS18.0软件进行，以P<0.05具有统计学意义，以相对危险度比值比（odds ratio，OR）和95%可信区间（95%confidence interval，95%CI）表示基因型和等位基因与结直肠癌的相关性。结果：（1）病例组与对照组-31G/C和-241T/C位点检出基因多态性，-141G/C位点未检测到G等位基因；对照组-31G/C等位基因频率与NCBI数据库中公布的全球人、亚洲人、欧洲人、非洲人分布间有显著性差异（P＜0.05）,-241T/C等位基因频率与NCBI数据库中公布的全球人基因频率分布无显著差异（P＞0.05）。（2）病例组与对照组-31G/C多态性位点CC与GG+GC基因型、GG与CC+GC基因型以及C与G等位基因的频率总体分布差异有统计学意义（P=0.002、P=0.026）。CC基因型与结直肠癌患病风险关联（OR=2.129,95%CI=1.303-3.479）。G等位基因是结直肠癌的保护性因素。-241T/C多态性位点各基因型及等位基因频率总体分布差异无统计学意义，与结直肠癌患病风险无相关性。（3）未发现-31G/C位点与结直肠癌发生部位（直肠、结肠）、组织学类型（腺癌、粘液腺癌）、分化程度（高、中-低）、浸润深度（非全层、全层）、淋巴结转移（无、有）等临床病理参数间的显著性差异。（4）-31G/C位点各基因型与肿瘤耐药相关标记表达间未发现相关性。结论：（1）泸州地区汉族人群survivin启动子-31G/C等位基因频率与NCBI数据库中公布的全球人、亚洲人、欧洲人、非洲人分布间有显著性差异,-241T/C等位基因频率与NCBI数据库中公布的全球人基因频率分布无显著差异。（2）Survivin启动子-31G/C多态性位点CC与GG+GC基因型、GG与CC+GC基因型以及C与G等位基因的频率在结直肠癌病例组与正常人群对照组中总体分布差异有统计学意义。CC基因型与结直肠癌患病风险关联。G等位基因是结直肠癌的保护性因素。（3）Survivin启动子-241多态性位点各基因型及等位基因频率在结直肠癌病例组和正常人群对照组中总体分布差异无统计学意义，与结直肠癌患病风险无相关性。（4）未发现survivin启动子-31G/C位点与结直肠癌发生部位（直肠、结肠）、组织学类型（腺癌、粘液腺癌）、分化程度（高、中-低）、浸润深度（非全层、全层）、淋巴结转移（无、有）等临床病理参数间具有相关性。（5）未发现survivin启动子-31G/C多态性与结直肠癌耐药相关标记物（Pgp、TS、GSTπ、TopoⅡ）间的相关性。