PC120-GFRα1基因工程细胞株的构建及GDNF下游信号传导通路研究

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作者将GDNF受体GFRα1转染到PC12细胞,使其同时表达GFRα1和Ret,从而构建一种方便、可靠的用于GDNF测活的细胞株,并为进一步研究GDNF的下游信号传导及神经营养作用机制带来方便,通过使用MAPKK抑制剂PD98059和PI-3激酶抑制剂LY294002来研究MAPK通路和PI-3激酶通路在GDNF诱导PC12细胞分化及促进其在无血清培养基中存活的作用.在已经构建了可以稳定表达GFRα1的细胞株PC12-GFRα1的基础上,研究细胞外调节激酶(ERK)-丝裂原-激活蛋白激酶通路(MAP)和磷酸肌醇激酶(PI3-kinase)通路在GDNF引起PC12细胞分化及促进PC12细胞在无血清培养基中存活的作用,将不同浓度的PD98059(MAPKK特异性抑制剂)加入PC12-GFRα1细胞中,培养15min后加入GDNF,观察PC98059对GDNF促PC12-GFRα1细胞存活及分化作用的影响,发现PD98059能够显著影响GDNF诱导细胞突起生长,而对GDNF促细胞存活作用则没有影响.
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