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本文针对土壤供铵水平显著不同的特点,从生理和分子生物学水平初步分析了作物对不同供铵水平的生理响应机制。利用荧光定量PCR技术重点分析了低铵水平下OsAMT1;2和OsAMT3;3在水稻不同生育期根中的表达水平,并应用铵吸收功能缺陷型酵母突变体研究了OsAMT1;2和OsAMT3;3对铵离子的转运功能及影响基因功能异源表达的可能因素;以水稻和番茄为材料,研究了不同铵敏感物种对高铵供应的响应差异,并着重分析了该两个物种间C、N含量以及C/N的差异和变化,探讨了不同物种间对高铵耐性差异的可能原因。
主要结果如下:
1.OsAMT1;2和OsAMT3;3在分蘖期的表达水平较苗期高,缺氮处理诱导两基因表达增强;
2.与AtAMT1;1相比较,OsAMT1;2在铵吸收功能缺陷型酵母突变体上仅表现部分吸铵能力,而OsAMT3.3则不能实现吸铵功能互补;
3.酵母突变体中OsAMT1;2的相对表达量仅有AtAMT1;1的50%。外源基因在酵母异源系统中的异源表达,除了与基因产物本身的功能有关,还取决于宿主酵母细胞对其表达水平的调控,因而表现出受内源机制调控的特征;
4.水稻和番茄对高NH4+响应差异显著,高铵胁迫下水稻的总根长显著高于番茄,根长可以作为作物耐高铵的生物学指标之一;
5.水稻和番茄的K+、Ca2+、Mg2+含量与供NH4+浓度显著负相关,水稻和番茄相对耐性的品种K+、Ca2+含量下降的幅度均小于相应的敏感性品种;但是在两物种之间差异不明显;由高铵引起的K+、Ca2+含量下降幅度不同可能是不同品种间耐高NH4+差异的原因之一;
6.随NH4+浓度升高水稻C含量不变、N含量上升,番茄C含量升高、N含量不变,导致水稻和番茄C/N变化趋势相反,可能是不同物种耐高NH4+差异的原因之一。