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肥胖已逐渐成为重要的全球性健康问题之一,也已经成为危害我国大众健康水平与人民生活状态的重要原因。同时,肥胖常伴随许多代谢综合征,包括2型糖尿病和心脑血管疾病等。所以,肥胖的预防及治疗就显得尤为重要。减肥手术虽然有效,但却存在手术失败和一系列副作用的问题。因此,从天然食品中寻觅具有降脂减肥效果的功能组分已然成为肥胖预防及治疗研究领域的热点。绿茶和苦丁茶是中国的传统茶饮料,绿茶的减肥作用已有大量研究,但苦丁茶是否也有同样的功效仍有待研究。苦丁茶在我国拥有超过2000年的历史,具有生津止渴、止咳化痰、提神醒脑与明目益智等功效。大叶冬青苦丁茶是其中3个主要品种之一,本课题通过体外细胞实验与体内动物实验系统性地研究了大叶冬青苦丁茶对肥胖的保护作用及对高脂膳食诱导的慢性炎症的调节作用。体外实验采用OP9细胞初步检测大叶冬青苦丁茶水提物(KD)的抗肥胖作用,通过油红O染色评估其对脂滴积累的抑制作用,通过qPCR方法对脂肪生成有关基因进行检测。体内实验将小鼠随机分为普通饲料对照组(ND)、高脂饲料模型组(HFD)和高脂饲料加大叶冬青苦丁茶组(HFD+KD)。在动物干预进程中,每周称量小鼠体重,每3天记录饮食。在干预后期,对小鼠开展葡萄糖耐量试验(GTT)、胰岛素耐量试验(ITT)和代谢笼实验。小鼠处死后,收集血液、肝脏、附睾脂肪、褐色脂肪等组织,检测与小鼠肥胖、胰岛素抵抗、附睾脂肪炎症等有关的指标。本文的主要结论有以下几点:(1)大叶冬青苦丁茶显著抑制脂肪细胞分化油红O染色结果表明,大叶冬青水提物能够显著抑制脂滴积累和细胞分化。qPCR结果显示,大叶冬青苦丁茶能够通过抑制脂肪生成相关基因PPARγ和FAS的转录水平,起到抗脂肪生成的作用。(2)大叶冬青苦丁茶能够改善高脂膳食诱导的肥胖小鼠体重和脂体比数据显示,大叶冬青苦丁茶可以有效减缓高脂膳食诱导的体重和脂体比的增加。脂肪组织的苏木紫-伊红(H&E)染色结果表明,大叶冬青苦丁茶可以抑制脂肪细胞的大小。以上结果说明大叶冬青苦丁茶能够抵抗肥胖的发生。(3)大叶冬青苦丁茶增强小鼠的能量代谢代谢笼结果显示,大叶冬青苦丁茶显著增强小鼠的O2消耗和CO2释放,同时还提高了小鼠的活动量和产热量,而对进食量没有影响。这说明大叶冬青苦丁茶可以通过增强能量代谢起到预防肥胖的作用。(4)大叶冬青苦丁茶具有护肝作用小鼠肝重、肝脏甘油三酯含量和病理切片结果显示,大叶冬青苦丁茶能够显著抑制肝脏脂质积累。肝功和血脂测定结果显示,大叶冬青苦丁茶可以显著改善血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆固醇(TC)和高、低密度脂蛋白胆固醇(HDL-c、LDL-c)等指标。(5)大叶冬青苦丁茶能够改善胰岛素敏感性和葡萄糖稳态大叶冬青苦丁茶能够显著降低高脂膳食小鼠的空腹血糖和血清胰岛素水平,升高脂肪组织和血清中脂联素(Adiponectin)的表达水平。GTT和ITT结果也进一步表明,大叶冬青苦丁茶可以改善高脂诱导的胰岛素抵抗及糖耐量受损。(6)大叶冬青苦丁茶能够抑制肝脏和脂肪组织中生脂基因的表达qPCR和Western blot结果显示,大叶冬青苦丁茶通过下调肝脏和脂肪组织中PPARγ和SREBP-1c等的表达,抑制生脂信号;同时上调AMPK的磷酸化水平,增强能量代谢。(7)大叶冬青苦丁茶能够改善高脂膳食诱导的慢性炎症Luminex结果显示,大叶冬青苦丁茶下调血清中促炎因子(IL-6、IFNγ、IL-1β、IL-2和IL-17)并上调抑炎因子(IL-4和IL-10)的水平。高脂膳食导致脂肪组织中p38和p65的磷酸化水平升高,而大叶冬青苦丁茶能够抑制炎症相关的p38和p65信号。此外,大叶冬青苦丁茶还能够逆转高脂膳食造成的瘦素(Leptin)等脂肪因子的增多。综上,本研究证明大叶冬青苦丁茶能够通过抑制脂肪生成和增强能量代谢对高脂膳食诱导的小鼠肥胖起到显著的保护作用,并且能够缓解高脂膳食导致的慢性炎症,进而改善胰岛素抵抗。这些研究结果为大叶冬青苦丁茶调节肥胖及有关代谢综合征提供了理论基础。