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缺血性脑血管病是一种常见的脑血管病,致残和致死率高,且在治疗过程中容易造成中枢神经系统缺氧/再灌注损伤。研究发现,血管紧张素Ⅱ2型受体(AngiotensinⅡtype 2 receptor,AT2R)能影响正常的神经可塑性和学习记忆等认知功能;可舒张血管,调节细胞生长发育,促进细胞增殖和分化,参与组织结构的修复和重塑;可通过促进侧枝循环开放,改善脑血液循环,对缺血性脑损伤起保护作用。目前,AT2R活化在神经细胞缺血/再灌注损伤中的具体作用及机制尚不清楚。本研究旨在探讨AT2R活化对缺氧/再供氧损伤PC12细胞生长的影响及初步机制。PC12细胞是大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞株,具有神经内分泌细胞的一般特征,被广泛应用于神经生理学等相关领域的研究。本研究采用含10%胎牛血清的高糖DMEM完全培养基,于37℃、5%CO2恒温培养箱中培养PC12细胞16~24h,当细胞密度达80-90%时,弃去培养液,无菌PBS洗三次,用含化学性缺氧剂连二亚硫酸钠(Na2S2O4)的无糖无血清培养基孵育1小时,再更换新鲜10%胎牛血清高糖DMEM培养基,复制缺血/再灌注损伤的神经细胞模型。缺氧/再供氧损伤PC12细胞分别予AT2R拮抗剂(PD123319)、AT2R激动剂(CGP42112)及P38MAPK抑制剂(SB203580)进行相应处理。经台盼蓝染色后显微镜下观察细胞活力变化,采用MTT法观察细胞存活率的变化,以逆转录聚合酶链式反应检测Bax、Bcl-2 mRNA表达的变化,以Western blot免疫印迹分析磷酸化P38MAPK、Bax、Bcl-2蛋白表达的变化。结果显示:1、显微镜下可见PC12细胞经Na2S2O4处理后,细胞出现肿胀,突起收缩,甚至断裂,死细胞被染成蓝色。MTT法检测的细胞存活率约为55-60%,提示复制PC12细胞缺氧/再供氧损伤模型成功。2、缺氧/再供氧损伤PC12细胞经PD123319处理后,与模型组相比,p-P38MAPK蛋白水平表达上调、而细胞存活率则显著下降、Bax mRNA水平明显上调、Bcl-2 mRNA的表达则明显下调(P<0.05)。3、缺氧/再供氧损伤PC12细胞经CGP42112处理后,与模型组相比,p-P38MAPK蛋白水平表达下调、细胞存活率显著增高、Bax mRNA水平明显下调、Bcl-2 mRNA表达明显上调(P<0.05)。4、缺氧/再供氧损伤PC12细胞经SB203580处理后,与模型组相比,p-P38MAPK蛋白水平表达下调、细胞存活率显著增高、Bax mRNA及蛋白表达水平均明显下调、Bcl-2 mRNA及蛋白表达均明显上调(P<0.05)。提示:1、AT2R活化能促进PC12细胞的生长,改善PC12细胞因缺氧/再供氧引起的细胞损伤。2、AT2R活化可通过抑制P38MAPK信号通路调控Bcl-2、Bax的表达,从而促进缺氧/再供氧损伤PC12细胞的生长。