MPTP毒理及GDNF营养作用中的钙相关机制研究

来源 :华中理工大学 华中科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:niqing813
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胞内游离钙离子是一种重要的第二信使,生理状态下它调控着细胞的许多重要生命活动.1.通过全细胞膜片钳技术和该课题中首创的三次重要膜片钳方法以及突起切断法,研究了MPP<+>对于MN9D细胞钙电流的影响;2.用显微荧光测钙技术检测MN9D多巴胺能细胞株ⅰCa<2+>ⅱ<,i>,首次发现:1)细胞处于静息状态下,MPP<+>在1小时内不会引起ⅰCa<2+>ⅱ<,i>的显著变化,但在24小时以后使细胞产生了严重的钙超载;2)当对细胞进行高K<+>去极化刺激时,MPP<+>在1小时以内便显现出对细胞钙清除能力的抑制,同时使得ⅰCa<2+>ⅱ<,i>对刺激的响应降低.这可能与MPP<+>使线粒体受损并导致胞内ATP含量下降有关.因此在作用流程上,线粒体损伤及ATP耗竭可能是MPP<+>使线粒体受损并导致胞内ATP含量下降有关.因此在作用流程上,线粒体损伤及ATP耗竭可能是MPP<+>直接作用所致,但钙超载和自由基损伤等则是多种因素长时间作用后的结果;3.第一次提供了MPP<+>对于递质释放的作用的结果;4.围绕GDNF的神经营养与保护作用,对于转GDNF基因细胞(MN90-GDNF/工程细胞)的生物特性从分子生物学、免疫生物化学和电生理等角度进行了研究;5.为了保证实验的稳定可靠,对于许多实验方法及实验装置进行了革新,其中包括:设计了单管微加药装置以及微碳纤电极的拉制和切割装置,首创了三次重复膜片钳方法和突起切断法.
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