藤黄酸诱导胃癌细胞凋亡及调节ETS1基因表达的实验研究

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目的:   1、观察藤黄酸对胃腺癌细胞株AGS的增殖抑制和诱导凋亡作用。   2、分析转录因子ETS1在胃癌细胞株AGS中及正常胃腺细胞GES中的表达。   3、研究藤黄酸对转录因子ETS1表达的影响。   方法:   1、以不同浓度的藤黄酸处理人胃腺癌细胞株AGS,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定其24h、48h增殖活性。   2、流式细胞术分析胃腺癌细胞株AGS的早期凋亡率。   3、逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测ETS1mRNA在胃癌细胞株AGS中及正常胃腺细胞GES中的表达及藤黄酸对胃腺癌细胞株AGS中ETS1mRNA表达的影响。   4、Westernblot法检测ETS1蛋白在胃癌细胞株AGS中及正常胃腺细胞GES中的表达及藤黄酸对胃腺癌细胞株AGS的ETS1蛋白表达的影响。   结果:   1、藤黄酸能明显抑制胃腺癌细胞株AGS增殖,其抑制作用呈时间和浓度依赖性,24h、48h的半数抑制浓度(IC50)分别为0.9μmol/L和0.7μmol/L。   2、藤黄酸可诱导胃腺癌细胞株AGS凋亡,其凋亡率呈浓度依赖性。   3、正常胃腺细胞GES中ETS1mRNA和蛋白呈低表达状态,胃腺癌细胞中ETS1mRNA和蛋白呈高表达,胃腺癌细胞株AGS中ETS1的mRNA和蛋白表达随着藤黄酸的干预浓度升高明显下降。   结论:   1、藤黄酸对人胃腺癌细胞株AGS有明显的生长抑制作用和显著的促凋亡作用。   2、人胃腺癌细胞株AGS中ETS1的表达明显较正常胃腺细胞中高;ETS1可能成为胃癌新的标记物、治疗靶点。   3、藤黄酸下调人胃腺癌细胞株AGS中ETS1mRNA和ETS1蛋白的表达。藤黄酸有望用于临床治疗胃癌的新型靶点药物;为临床胃癌的早期诊断、靶向治疗、预后提供新的思路和理论基础。
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