【摘 要】
：
目的:比较脐血源和肿瘤患者外周血源的细胞因子诱导杀伤细胞（cytokine-induced killer,CIK）在培养基和IL-2（interleukin-2,IL-2）浓度不同时的细胞扩增倍数,找出更加适合CIK细胞生长的体外培养环境,然后比较两种CIK细胞在相同的培养条件下的增殖指数,以期在找到一种稳定、高效的培养方法的同时,筛选出一种具有大量增殖潜力的种子细胞来源;将两种来源的CIK和肝癌
论文部分内容阅读
目的:比较脐血源和肿瘤患者外周血源的细胞因子诱导杀伤细胞（cytokine-induced killer,CIK）在培养基和IL-2（interleukin-2,IL-2）浓度不同时的细胞扩增倍数,找出更加适合CIK细胞生长的体外培养环境,然后比较两种CIK细胞在相同的培养条件下的增殖指数,以期在找到一种稳定、高效的培养方法的同时,筛选出一种具有大量增殖潜力的种子细胞来源;将两种来源的CIK和肝癌细胞的共培养,比较两种CIK对肝癌细胞的体外杀伤效果,寻找其杀伤肝癌细胞的最佳作用时间及最佳效靶比,为肝癌细胞免疫治疗及未来的临床研究提供实验基础。研究方法:采用RPMI1640、GT-T551两种培养基,IL-2终浓度分别为0 IU/ml、200 IU/ml、500 IU/ml的培养体系对脐血源和肿瘤患者外周血源的单个核细胞进行诱导培养,光学显微镜下观察诱导得到的CIK细胞形态变化,台盼蓝计数细胞,并绘制生长曲线,计算CIK细胞扩增倍数。通过CCK8（Cell counting Kit-8,CCK8）检测法测定细胞的增殖趋势,流式细胞仪测定两种CIK细胞在诱导后CD3、CD56的表型变化。培养第10天,将获得的两种来源CIK细胞分别与肝癌细胞株-7721共培养,检测其对肝癌细胞的体外杀伤能力。采用SPSS20.0软件对实验数据进行统计学分析。结果:1.采用RPMI1640培养基时,脐血CIK与患者外周血CIK细胞在不同IL-2浓度时的扩增倍数分别为（19.7±3.5）vs（5.3±2.2）、（55.1±2.6）vs（31.5±4.1）、（92.9±8.9）vs（58.8±4.8）（P<0.05）。采用GT-T551培养基时,脐血CIK与患者外周血CIK细胞在不同IL-2浓度时的扩增倍数分别为（33.9±1.4）vs（13.0±4.2）、（87.7±3.8）vs（45.3±1.8）、（131.6±9.2）vs（84.7±7.8）（P<0.05）。2.脐血CIK与患者外周血CIK细胞经诱导培养后,两者CD3+CD56+细胞比例分别为（27.2±4.7）%和（22.1±5.3）%,无明显差异（P>0.05）。3.两种CIK细胞与肝癌细胞共培养24h后,按效靶比由低到高脐血CIK与患者外周血CIK的杀伤率分别为（7.6±1.5）%vs（5.3±0.4）%、（14.5±2.0）%vs（6.0±0.3）%、（30.1±3.8）%vs（17.1±4.6）%、（46.4±3.3）%vs（31.5±5.7）%（P<0.05）。共培养48h两者杀伤率分别为（9.1±0.4）%vs（7.3±0.7）%、（21.9±2.2）%vs（12.4±1.1）%、（42.4±4.1）%vs（29.9±4.2）%、（58.8±4.8）%vs（44.5±3.2）%（P<0.05）。共培养72h两者杀伤率分别为（11.3±2.6）%vs（9.8±2.7）%、（33.5±3.8）%vs（25.1±4.6）%、（49.8±1.8）%vs（40.6±3.0）%、（66.7±2.8）%vs（55.6±2.5）%（P<0.05）。除外周血CIK组共培养24h,效靶比在10:1与20:1时的结果比较P>0.05,其余均有统计学意义。结论:1.两种培养基均能有效的促进CIK细胞的增殖,GT-T551培养基对两种来源的CIK细胞增殖的促进作用更加明显,说明GT-T551培养基更适于CIK细胞的体外培养,而且CIK细胞的扩增对IL-2有浓度依赖性,IL-2浓度越高细胞扩增倍数越高。2.虽然脐血源CIK细胞比患者外周血源CIK的扩增速度更快,但二者的CD3+CD56+细胞表型占比无明显差异。3.脐血CIK的杀瘤作用更强,且CIK细胞对肝癌7721细胞的杀伤效应与效靶比呈正相关,即效靶比80:1时杀伤率最高,共培养72h为最佳作用时间。
其他文献
目的评估血清胃蛋白酶原I和II的比值（Pepsinogen I/Pepsinogen II,PGR）、胃泌素-17（Gastrin-17,G-17）联合幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,HP）检测在胃癌早期筛查中的价值,以明确血清胃蛋白酶原（Pepsinogen,PG）和G-17与胃黏膜病变程度、病变部位的相关性,以及幽门螺杆菌感染对上述指标的影响,探究早期胃癌筛查有效的评估方法
目的新生儿黄疸是新生儿期常见的症状,近期研究发现新生儿高胆红素血症可对患儿的肝肾、心肺等器官组织和血液、免疫系统造成损伤,因此早期诊断对该病的防治具有关键意义。本课题的目的:1)主要是通过检测高胆红素血症新生儿血清中总胆红素和肌钙蛋白、乳酸脱氢酶、肌酸激酶同工酶、BNP等数值的改变,观察高胆红素对心肌的影响,对早期新生儿高胆红素血症与心肌损害的相关性进行临床分析。2)观察合理应用营养心肌药物对改善
目的:探讨中青年原发性高血压患者合并不同类型心律失常时,血压水平及心率变异性与心律失常类型、频率之间的关系,为中青年原发性高血压患者心律失常的预防及治疗提供参考依据。研究对象:选择自2017年12月至2018年10月来泰安市中心医院就诊的中青年原发性高血压患者160例,其中男性99例,女性61例,年龄19岁-59岁,（平均48.48±7.15岁）。所有研究对象均符合《中国高血压防治指南2010年修
目的:本研究旨在探讨VEGF基因3’非翻译区936C/T单核苷酸多态性与临床及生化指标之间的相关性,以及与2型糖尿病合并周围神经病变（Diabetic peripheral Neuropathy DPN）之间的关系,从而为2型糖尿病周围神经病变的防治提供理论基础。研究对象根据WHO1999年糖尿病的诊断以及排除标准[8],选取2015年9月至2017年10月连续两年入住山东第一医科大学第二附属医院
目的:比较艾拉莫德（IGU）、甲氨蝶呤（MTX）单独治疗以及艾拉莫德联合甲氨蝶呤（IGU+MTX）治疗对类风湿关节炎患者的疗效及安全性指标,评价艾拉莫德（IGU）、甲氨蝶呤（MTX）单独或联合用药的疗效及安全性差异。方法:以2017年6月至2018年6月泰安市中心医院及肥城市人民医院风湿免疫科接收的符合纳入标准的受试者为研究对象,随机分为IGU组、MTX组和IGU+MTX组。于受试者入组筛选时、开
第一部分128层双源CT改良回顾性心电门控与非门控扫描在支气管动脉成像中的应用价值目的:探讨128层双源CT（DSCT）改良回顾性心电门控扫描与非门控扫描在支气管动脉显示及图像质量方面的临床应用价值。应用第二代DSCT并使用两种扫描方法获得原始支气管动脉图像,并分析所获取的原始数据,进一步获得BA的显影效果及图像质量等数据,探讨其显影效果并对其图像质量进行对比分析。方法:回顾性分析2017年1月-
背景目前,脑血管病已经成为我国居民第一位死因,也是单病种致残率最高的疾病。与全世界发病情况相比较,我国脑卒中发病率处于较高的水平,并且呈现逐渐上升趋势,平均每年增加约6.5%,脑卒中每年新发约有240万人,每年死于脑卒中的约有110万人,存活的脑卒中患者约有110多万。脑血管病已经成为我国人群健康的主要威胁。目的本研究利用中国疾病预防控制信息系统中2008-2016年某县户籍居民的脑血管病的死亡资
目的星形胶质细胞在神经系统疾病中的作用越来越被人们认识,脑内星形胶质细胞可以直接调节神经功能、生存和活动,调节神经细胞内外离子浓度和传递第二信使以及摄取、灭活和供给神经递质等作用。三叉神经血管学说为偏头痛的主要发病机制,三叉神经节包括神经细胞和神经胶质细胞,星形胶质细胞在该病的病理生理学和治疗中的作用还缺乏明确的特征。本课题试图找到星形胶质细胞在偏头痛发病中的功能和作用,并进一步研究偏头痛的发病机
目的:探讨软组织肿瘤周边特殊MRI征象对其生物学分类的应用价值,为临床治疗方案的选择提供可靠的影像依据。方法:回顾性分析2017年1月至2018年6月间因发现局部软组织肿块或肿胀不适就诊山东省医学影像研究所的软组织肿瘤患者43例,以上患者术前均行西门子3.0T超导磁共振增强检查,从PACS系统获取影像资料,且均有病理学检查证实（术后病理31例,穿刺活检12例）,以上患者包括良性肿瘤18例,恶性肿瘤
目的胃腺癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,已经严重威胁人类健康。由于胃腺癌在生物学和遗传上具有异质性,且患者早期症状多不明显,就诊时已处于进展期或者晚期,因此治疗效果较差。目前已有的胃腺癌筛查及诊断方法尚不能满足需求,所以寻找到简单、有效的筛查及辅助诊断策略对于临床具有很高的应用价值。本研究基于质谱技术对胃腺癌进行血清和组织蛋白质组学研究,拟建立胃腺癌血清诊断预测模型,鉴定模型的差异蛋白/多肽,对胃腺