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原发性肝癌具有发病隐秘、病程漫长、病死率较高等特点,是一种严重危害人类健康的恶性肿瘤病。目前,对于原发性肝癌的治疗主要采取姑息性手术治疗、化学药物治疗等方法,虽然这些方法具有一定的治疗效果,但同时具有高风险、毒副作用大、对机体损伤严重等弊端。因此,现在亟需挖掘出效果良好的毒副作用小的天然抗肿瘤药物并应用到临床治疗,这些药物的开发必将对恶性肿瘤病的防控具有重大的现实意义。众多研究表明,抗肿瘤作用是植物活性多糖的一个重要的生物学活性。因此,本研究以肝癌肿瘤HepG2细胞为指示细胞,系统研究了银杏叶多糖(GBLP)对HepG2细胞增殖抑制作用及诱导凋亡的分子机制,实验结果如下:本研究首先利用水提醇沉法提取GBLP,经过脱色、脱蛋白、透析等处理获得了纯度较高的GBLP,苯酚硫酸法测得多糖含量为82.60%;红外光谱分析显示GBLP含有多糖类物质的特征性吸收峰;体外抗氧化试验表明GBLP对DPPH·、O2-·自由基及H2O2具有较强的清除能力,对铁离子具有一定的还原能力,说明了GBLP具有较好的体外抗氧化活性,并与多糖浓度呈正相关关系。本研究利用不同浓度的GBLP溶液与HepG2共孵育48h,MTT试验结果显示,当GBLP溶液的浓度达到1400μg/ml时,GBLP对HepG2的抑制率达到了37.42%。运用流式细胞技术检测了细胞的凋亡率,当GBLP溶液的浓度达到1400μg/ml时,细胞凋亡率达到了13.3%。以上结果表明GBLP对HepG2增殖具有明显的抑制作用,且呈剂量依赖效应。采用免疫印迹技术(Western Blot)分析了细胞凋亡关键酶caspase-9、caspase-3、PARP的表达情况,并检测了Bcl-2及Bax蛋白的翻译水平和致癌蛋白Mutant-p53的表达量,结果表明,GBLP可有效的激活caspase-9、caspase-3以及切割PARP来促进HepG2的凋亡;下调Bcl-2和上调Bax的表达量来进一步诱导线粒体的损伤;减少致癌蛋白Mutant-p53的表达。综上,GBLP对HepG2细胞的增殖与凋亡平衡具有良好的调控作用。