前言 随着现代医学的发展，使真菌感染发生率逐渐增多。各种唑类药物特别是氟康唑(FCZ)有效地治疗了念珠菌感染，广泛应用于临床治疗和预防。但是自1998年FCZ问世到目前，世界上已有许多国家报道过FCZ的耐药现象。本实验研究了从肺部感染患者分离出的35株念珠菌的药物敏感性，并在体外联合应用环孢菌素研究其对氟康唑的抗真菌作用的影响。 实验材料 一、菌株来源 2000年1月-2000年6月我院呼吸科病房住院病人中分离出真菌35株。标准菌株，购自中国科学院微生物研究所。 二、试验试剂 改良沙氏培养基，药敏培养基：RPMI—1640(含谷氨酰胺，不含碳酸氢钠)，MOPS，念珠菌显色培养基，FCZ，5-FC，环孢菌素(新山地明，Cy)。 三、试验仪器 小型三用水箱，电热恒温培养箱，酶标光度计，微量振荡器，Olympus显微镜(日本Olympus公司)。 实验方法 一、标本的采集 肺部感染患者刷牙、漱口后，用力咯出肺深处痰，立即行细菌学检查，每隔2－3日采集一次，直至①确定感染菌种、②病情好转，或③死亡。 二、真菌培养及鉴定 1．标本涂片，革兰氏染色，镜检。 2．标本以四区划线法接种于血平板、麦康凯平板以及改良沙氏培养基内。 3．菌落涂片、染色，观察芽管、厚膜抱子，念珠菌显色培养基接种培养鉴定。 三、药敏试验 药敏试验采用1997年NCCLS公布的M－27A方案微量稀释法。 四、环抱菌素联合试验 药敏液及菌液制备，联合试验，培养及结果判定。 实验结果 一、真菌的菌种分布 在分离到的35株念珠菌中，白色念珠菌26株门．29％入热带念珠菌6株门．14％入平滑念珠菌1株K．86％入其它2株（5．71防）。 二、抗真菌药敏感性测定 大部分念珠菌均对FCZ和5－FC敏感，只有3株对两药呈现剂量依赖性敏感，这3株拥0是平滑念1株及其它类念珠菌2株。 三、氟康唆和环抱菌素联合试验 选临床分离到的平滑念1株在协同试验里加人Cy后，显示FCZ的 MIC并未改变，仍为0．spg／Inl，但是在 FCZ浓度大于 MIC值时，与C＞（＞0．156ug／rnl）共同作用后，杀菌作用增强。同样又 ·2·做了对于白念和热带念的试验，结果相似。为了研究杀菌作用增强的具体量化指标，我们又做了进一步试验，改变了平滑念菌株的接触浓度，结果显示菌生长计数至少减少 s og。 讨 论 临床上真菌感染多为内源性条件致病性真菌感染，常在机体抵抗力下降时过度繁殖致病，常见有慢性基础疾病，免疫功能降低，应用多种抗生素凋身应用激素及实行侵人性操作等，这些是引起真菌感染的高危因素。本研究共分离出35株真菌，其中白念26株门4．29％入热带念6株O7．14％入平滑念1株闪．86％X显示临床上肺部真菌感染可能仍以白念为主。检测35株临床分离株对 FCZ和 5－FC的药敏情况的结果表明，绝大多数菌株 91．43％（3乃5）对 FCZ敏感，8．57％呈剂量依赖性敏感，对 5－FC94．29％敏感，5．71％呈剂量依赖性敏感，耐药株均未见。协同试验中 FCZ和 Cy合用后，显示在未增加 FCZ用药量的情况下，杀菌作用增强。所以在临床用药上应重视实验室真菌培养及鉴定，合理应用抗真菌药，防止耐药株的产生。当然对于FCZ和Cy联。合应用的在体疗效，还有赖于临床体内试验进一步证实。 结 论 1．念珠菌属对 FCZ的敏感率为 91．43％，8．57％为剂量依赖性敏感；对 5－FC94．29％敏感，5．71％为剂量依赖性敏感，耐药株未见。 z．体外试验显示FCZ和Cy合用，杀菌作用增强。 3．临床上肺部真菌感染可能仍以白念居多门．29％人