【摘 要】
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目的:通过人宫颈癌细胞中侧群细胞的富集、分离和鉴定,确定其肿瘤干细胞特性,探讨以侧群细胞作为宫颈癌干细胞研究切入点的可行性。
方法:收集35例宫颈癌患者的手术标本,通
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目的:通过人宫颈癌细胞中侧群细胞的富集、分离和鉴定,确定其肿瘤干细胞特性,探讨以侧群细胞作为宫颈癌干细胞研究切入点的可行性。
方法:收集35例宫颈癌患者的手术标本,通过原代培养、流式细胞荧光激活分选法将宫颈癌细胞分为侧群细胞(SP)和非侧群细胞(NSP)两个亚群,观察两组细胞的增殖和分化能力,并进行裸鼠接种以观察其成瘤能力,化疗药物顺铂以不同浓度作用于SP细胞和NSP细胞后计算细胞抑制率,以评价两组细胞对化疗药物的耐受性。
结果:人宫颈癌细胞中侧群细胞的比例约为2.04%±0.93%,侧群细胞的比例随分化程度的降低而下降(P<0.05)。细胞生长曲线(MTT法)显示,SP细胞的体外增殖能力明显强于NSP细胞(P<0.05);SP细胞的克隆形成能力明显强于NSP细胞(63.40%±1.60%,10.47%±0.42%,P<0.01);行裸鼠接种时,SP细胞表现出较强的致瘤性,只需1×103个即可致瘤,其致瘤能力是NSP细胞的100倍,且成瘤时间显著缩短(P<0.05);化疗药物顺铂以不同浓度分别作用于SP细胞与NSP细胞24h后,SP细胞的抑制率明显低于NSP细胞(P<0.05);初次分选获得的SP细胞亚群经体外培养2周后可扩增产生SP细胞(2.07%±1.07%),而NSP细胞亚群经体外培养2周后仅产生比例极低的侧群细胞(0.13%±0.16%)。
结论:人宫颈癌细胞中存在外排Hoechst33342荧光染料的SP细胞,分化越差的肿瘤细胞其SP细胞比例越低。宫颈癌SP细胞体外增殖能力、克隆形成能力、裸鼠成瘤能力均强于NSP细胞,对化疗药物具有较强的耐受性和不对称分裂能力,具备肿瘤干细胞的特性,可作为宫颈癌干细胞研究的切入点。
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