动物乳腺组织特异性表达载体的构建及其在培养的乳腺上皮细胞中的表达

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利用动物克隆技术生产动物乳腺生物反应器可以大大提高转基因效率.乳腺上皮细胞是动物克隆过程中的一种理想的供体细胞.作为核供体需要细胞能够进行体外培养和遗传学操作.因此该实验1、对家兔和小鼠的乳腺上皮细胞进行了原代培养.为了提高上皮细胞的成活率和比例,进行了以下几种处理:(1)在PBS中加葡萄糖,用它稀释胶原酶III消化细胞;(2)采用分阶段消化法消化细胞,选择第二阶段的细胞进行培养;(3)用消化下的小组织块代替单个乳腺细胞.结果成功地培养出了小鼠和家兔的原代乳泉上皮细胞.2、为使目的基因在乳腺细胞中进行表达,该文还构建了两个乳腺组织特异性表达载体pBLG-hGH和pBLG-EGFP.
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