细菌EPSP合成酶基因(aroA)的优化及其应用

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该论文采用先进的基因序列优化技术,以鼠伤寒沙门氏杆菌(Salmonellatyphimurium)和大肠杆菌(Escherichiacoli)的EPSP合成酶基因为模板,通过随机结合、交错延伸的PCR扩增过程,克服定点突变的局限性,使基因序列获得多位点突变,我们从所获得的突变体中,筛选到五个发生正向突变的、具有高抗性的突变基因,分别标记为aroAM1、aroAM2、aroAM4、aroAM11和aroAM12,并使之在大肠杆菌中表达.该论文还选用了CaMV35S启动子序列、烟草转导肽TSP序列、Nos终止子序列和双元质粒pCAMBIA1300,构建成植物表达载体,把aroAM1基因,导入到模式植物烟草中,获得抗草甘膦的转基因烟草.初步证明获得的突变基因,可被应用于培育抗草甘膦转基因农作物.
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