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1.目的：检测血清中磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(Glypican-3,GPC3)的表达，探讨其在肝细胞癌(HCC)中的诊断价值，并探讨GPC3mRNA和GPC3蛋白在肝细胞癌中的表达情况及其临床意义。
2.方法和结果：
本研究分两部分。
第一部分是探讨血清GPC3蛋白测定对HCC的诊断价值。运用酶联免疫吸附试验(ELISA)，检测了67例HCC、41例肝硬化和30例正常人血清GPC3，结果显示HCC病人血清中GPC3蛋白浓度(10.85±0.58μg/L)明显高于肝硬化组(2.45±0.61μg/L)和正常组(1.14±0.22μg/L)。以3μg/L为诊断界值，血清GPC3蛋白诊断HCC的敏感性和特异性分别为：88.1％和85.9％。当AFP以20μg/L为诊断界值时，其对HCC的敏感性和特异性为别为：65.7％和76.2％。GPC3对HCC诊断的敏感性显著高于AFP(P=0.001)。在23例AFP阴性HCC患者中有17例GPC3阳性，阳性率为73.9％(17/23)。GPC3的ROC曲线下面积大于AFP(0.898 vs 0.814)。联合AFP和GPC3对HCC的敏感性和特异性分别为91.0％和70.4％。
本研究第二部分是研究GPC3mRNA及蛋白在HCC中的表达及临床意义。运用RT-PCR和免疫组化(IHC)共检测了59例HCC组织及其癌旁组织、10例肝内胆管细胞癌组织、11例肝硬化肝组织、14例正常肝组织(肝血管瘤旁)中GPC3mRNA及蛋白的表达。结果显示：GPC3mRNA在HCC组织中的阳性率为83.1％(49/59)，明显高于癌旁组织35.6％(21/59)(x2=27.53，P=0.0001)。GPC3蛋白在HCC中的阳性率为78.0％(46/59)，也明显高于癌旁阳性率32.2％(19/59)(x2=24.97，P=0.0001)。而GPC3mRNA及蛋白在肝内胆管细胞癌、肝硬化和正常肝组织中不表达。单因素分析显示AFP≥20μg/L、肿瘤病理分级和肿瘤包膜的完整性与GPC3蛋白表达有关(P＜0.05)。多自变Logistic回归分析，显示AFP水平(OR=0.060，95％CI：0.011～0.336，P=0.001)和肿瘤的病理分级(OR=0.191，95％CI：0.038～0.954，P=0.044)是影响GPC3蛋白在HCC中表达的独立因素。Spearmen相关分析显示肿瘤病理分级与GPC3表达的程度明显相关(R=0.315，P=0.015)。Kaplan-Meier生存分析显示在HCC组织中GPC3(+)组病人的1年无瘤生存率明显低于GPC3(-)组(33.6％ vs 72.7％，P=0.028)；癌旁组织GPC3(+)组病人的1年无瘤生存率也低于GPC3(-)组(23.5％ vs 40.1％，P=0.023)；随着GPC3在HCC组织中表达强度的增加，患者的无瘤生存率也明显降低。Cox风险回归模型分析，结果显示肿瘤AFP阳性(OR=0.372，95％CI：0.140～0.90，P=0.048)、肿瘤大小(OR=5.215，95％CI：1.737～15.656，P=0.003)、癌旁组织GPC3表达(OR=0.226，95％CI：0.085～0.599，P=0.003)、肿瘤GPC3表达的强度(OR=1.946，95％CI：1.080～3.507，P=0.027)是影响患者术后无瘤生存率的独立危险因素。
3.结论：
(1).血清GPC3蛋白对HCC诊断的敏感性和特异性分别为88.1％和85.9％，明显优于AFP，值得临床推广应用。
(2).GPC3-mRNA及蛋白在肝细胞癌组织中高表达，而在肝内胆管细胞癌组织、肝硬化组织和正常肝组织不表达。
(3).GPC3蛋白在HCC中的表达与血清AFP水平、病理分级有关，AFP水平和肿瘤的病理分级是影响GPC3蛋白表达的独立因素。
(4).癌旁组织GPC3表达、肿瘤GPC3表达的强度是影响HCC患者术后无瘤生存率的独立危险因素。