论文部分内容阅读
目的：本研究旨在探讨p38 mRNA和ERK 1/2 mRNA在大鼠肢体缺血预处理(limb ischemic preconditioning，LIP)脑保护作用机制中的表达。使用Real-time PCR技术观察大鼠海马CA1区p38 MAPK mRNA和ERK 1/2 mRNA的表达。 方法： 1. P38 MAPK mRNA和ERK 1/2 mRNA在LIP诱导的大鼠脑缺血耐受中的表达。90只永久凝闭椎动脉的大鼠随机分为sham、全脑缺血(brain ischemia，BI)和LIP+BI组。各组动物在sham手术或末次缺血再灌注后0 h，3 h，6 h，12 h，1 d，2 d断头留取海马CA1区脑组织。 参照实验1的结果，以下实验内容中各组动物在 sham 手术或末次缺血/再灌注12 h后断头留取海马CA1区脑组织。 2.切断股神经和/或坐骨神经对LIP诱导的脑缺血耐受大鼠CA1区p38 MAPK mRNA和ERK 1/2 mRNA表达的影响。45只永久凝闭椎动脉的大鼠随机为sham、BI、LIP+BI、股神经截断(femoral nerve transection，FNT)+BI、FNT+LIP+BI、坐骨神经截断(sciatic nerve transection，SNT)+BI、SNT+LIP+BI、FNT+SNT+BI和FNT+SNT+LIP+BI组。 3.自由基清除剂对LIP诱导的脑缺血耐受大鼠CA1区p38 MAPK mRNA和ERK 1/2 mRNA表达的影响。永久凝闭椎动脉的大鼠25只，随机分为sham、BI、LIP+BI、DMTU+LIP+BI和DMTU+sham组。 4.腺苷途径中LIP诱导的脑缺血耐受大鼠CA1区p38 MAPK mRNA和ERK 1/2 mRNA的表达。 1)腺苷A1受体拮抗剂对LIP诱导的脑缺血耐受大鼠CA1区p38 MAPK mRNA和ERK 1/2 mRNA表达的影响。椎动脉凝闭后的大鼠25只随机分为sham、BI、LIP+BI、DPCPX+LIP+BI和DPCPX+sham组。 2)腺苷(Ade)对全脑缺血大鼠海马CA1区p38 MAPK mRNA和ERK 1/2 mRNA表达的影响。椎动脉凝闭后的大鼠20只随机分为sham、BI、Ade+BI和Ade+sham组。 结果： 1. P38 MAPK mRNA和ERK 1/2 mRNA在LIP诱导的大鼠脑缺血耐受中的表达。与BI组对应时间点对比，CA1区LIP+BI组的p38 MAPK mRNA和ERK 1/2 mRNA表达于6 h开始上调，12 h到达高峰，之后逐渐下降。提示LIP脑保护作用中上调了p38 MAPK mRNA和ERK 1/2 mRNA的表达。 2.切断股神经和/或坐骨神经对LIP诱导的脑缺血耐受大鼠CA1区p38 MAPK mRNA和ERK 1/2 mRNA表达的影响。与LIP+BI组比较，FNT+LIP+BI、SNT+LIP+BI和FNT+SNT+LIP+BI组p38 MAPK mRNA和ERK 1/2 mRNA的表达明显减小。提示切断股神经和/或坐骨神经，LIP脑保护作用中p38 MAPK mRNA和ERK 1/2 mRNA的表达降低。 3.自由基清除剂对LIP诱导的脑缺血耐受大鼠CA1区p38 MAPK mRNA 和 ERK 1/2 mRNA 表达的影响。DMTU+LIP+BI 组 p38 MAPK mRNA和ERK 1/2 mRNA表达量比LIP+BI组明显减少，说明LIP部分通过自由基途径上调了脑缺血大鼠海马CA1区p38 MAPK mRNA和ERK 1/2 mRNA的表达。 4.腺苷途径对LIP诱导的脑缺血耐受大鼠CA1区p38 MAPK mRNA和ERK 1/2 mRNA表达的影响。DPCPX+LIP+BI组p38 MAPK mRNA和ERK 1/2 mRNA的表达量比LIP+BI组明显减少，Ade+BI组p38 MAPK mRNA和ERK 1/2 mRNA表达量较BI组明显增多，均提示LIP通过腺苷途径部分上调了p38 MAPK mRNA和ERK 1/2 mRNA的表达。 结论： LIP部分通过股神经和/或坐骨神经途径、自由基途径、腺苷途径上调了p38 MAPK mRNA和ERK 1/2 mRNA的表达。