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目的多发性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)是血液系统常见的恶性肿瘤。随着我国人口老龄化加剧,MM发病率呈现出上升趋势且发病年龄越来越低。MM的病因复杂,潜在的分子病因尚不清楚,以致MM仍然为不可治愈的恶性肿瘤。越来越多的研究证实长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)参与许多生物学过程中的调控。有研究报道lncRNASNHG16作为致癌基因在多种肿瘤组织中异常表达,lncRNA SNHG16还参与癌症的发病和发展,包括增殖、迁移和侵袭等。然而,lncRNASNHG16在MM中的作用以及潜在分子机制仍然未知。本研究拟通过明确lncRNASNHG16在MM临床样本和细胞中的表达,并通过细胞功能实验证实lncRNASNHG16对MM细胞增殖、周期和凋亡的影响,探讨其可能的分子机制,为寻找MM新的肿瘤分子标志物及药物治疗靶点提供一定理论依据。方法(1)收集2018年06月到2019年01月之间前来南通大学附属医院血液科就诊的20例MM患者新鲜的骨髓样本以及同期在医院进行体检的15名健康志愿者新鲜骨髓样本,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测样本和细胞中lncRNASNHG16相对表达水平。(2)qRT-PCR检测RPMI-8226、NCI-H929细胞和外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)中 lncRNA SNHG16 相对表达水平。(3)设计能特异性干扰lncRNA SNHG16表达的siRNA序列,通过瞬时转染方法将si-SNHG16转染RPMI-8226和NCI-H929细胞并检测其干扰效率。(4)将si-SNHG16转染RPMI-8226和NCI-H929细胞,以MTS实验、流式细胞分析和Western blot分别检测si-SNHG16对细胞增殖和周期、凋亡的影响,以及相关蛋白表达的影响。(5)采用荧光素酶报告基因实验检测lncRNASNHG16与miR-342-3p之间的相互作用。(6)miR-342-3p 过表达和 miR-342-3p 沉默实验验证 lncRNA SNHG16 与 miR-342-3p对RPMI-8226和NCI-H929细胞增殖、周期、凋亡以及相关蛋白表达的影响。结果(1)与健康志愿者骨髓样本中lncRNA SNHG16相对表达水平相比,MM患者骨髓样本中lncRNASNHG16相对表达水平显著上调。(2)与 PBMC 中 lncRNASNHG16 相对表达水平相比,RPMI-8226 和 NCI-H929细胞中lncRNASNHG16相对表达水平均显著上调。(3)干扰lncRNA SNHG16表达能够显著抑制RPMI-8226和NCI-H929细胞增殖,增加G1期细胞比例,降低S期细胞比例,促进细胞发生凋亡。(4)干扰lncRNA SNHG16表达能够显著促进RPMI-8226和NCI-H929细胞中cleaved-Caspase-3、cleaved-Caspase-9,Foxo3a 和 Bax 表达,抑制 CCND1基因、BBcl-2、Cyclin D1、PI3K 和 p-AKT 表达。(5)lncRNASNHG16可以直接与miR-342-3p结合,在MM临床样本和细胞中miR-342-3p表达与lncRNA SNHG16表达呈负相关。(6)miR-342-3p过表达能够显著抑制RPMI-8226和NCI-H929细胞增殖,增加G1期细胞比例,降低S期细胞比例,促进细胞发生凋亡;促进cleaved-Caspase-3、cleaved-Caspase-9,Foxo3a 和 Bax 表达,抑制 Bcl-2、Cyclin D1、PI3K 和 p-AKT 表达。(7)干扰lncRNASNHG16表达同时沉默miR-342-3p表达能够显著促进RPMI-8226 和 NCI-H929 细胞增殖,降低 G1 期细胞比例,增加 S 期细胞比例,抑制细胞发生凋亡;抑制 cleaved-Caspase-3、cleaved-Caspase-9,Foxo3a 和 Bax 表达,促进Bcl-2、Cyclin D1、PI3K 和 p-AKT 表达。结论(1)lncRNA SNHG16在MM患者骨髓样本和MM细胞系中相对表达水平均显著上调。(2)干扰lncRNA SNHG16表达能够显著抑制MM细胞增殖,诱导细胞停滞在G1期,促进细胞发生凋亡以及诱导细胞周期、凋亡、PI3K/AKT途径相关蛋白或基因表达。(3)lncRNA SNHG16 可以直接与 miR-342-3p 结合。干扰 lncRNA SNHG16 表达通过吸附miR-342-3p抑制MM细胞增殖,促进细胞凋亡。(4)miR-342-3p过表达对MM细胞增殖产生的影响与干扰lncRNASNHG16表达对MM细胞增殖产生的影响相似,而沉默miR-342-3p表达能够逆转干扰lncRNA SNHG16表达对MM细胞增殖产生的影响。