羊膜软组织填充材料植入预防周围神经粘连的实验研究

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目的:本实验研究羊膜软组织填充材料植入对预防周围神经损伤修复术后粘连的作用和机制。以期为临床预防周围神经损伤术后粘连提供一种新的材料和方法。过去,在临床工作中我们经常应用玻璃酸钠、醋酸强的松龙、几丁糖等药物进行神经损伤部位的局部注射,以期能够很好的解决周围神经损伤术后神经粘连的问题。但是因为这些物质所特有的化学性质,这些防粘连物质在生物体内降解吸收时间很快,其隔离屏障阻挡的作用并不能达到我们所预期希望的时间。而且这些物质并没有促进上皮细胞生长、抑制成纤维细胞生长的细胞生物活性,所以在实验和临床观察中利用这些物质所能达到的防粘连效果并不理想。基于此,我们也在不断探索和寻找一种更加理想的防粘连材料。在临床实验中我们发现羊膜软组织填充材料具有通透性,能起到屏障作用,防止神经与周围组织之间形成粘连带,其良好的生物相容性好,所形成的再生室对神经恢复起到了促进作用。通过本实验我们希望其能为羊膜软组织材料的临床应用提供理论依据,从而为临床提供一种预防周围神经损伤术后粘连的新材料。方法:取清洁级SD大鼠48只,雌雄不拘,由河北医科大学动物实验中心提供。1手术方法:按照随机原则选取24只大鼠做为实验组,麻醉成功后,固定于手术台,随机选取一侧下肢作为实验侧,将其后侧的毛用备皮刀剃除干净,术者戴无菌手套用碘伏对股部后侧术区进行消毒,铺无菌洞巾,于股骨后侧正中纵切口,分离皮下组织,由股后外侧肌间隙分离显露大鼠坐骨神经,距离坐骨神经出口2cm处,用显微器械切断坐骨神经,造成神经损伤模型。在手术显微镜下将坐骨神经断端用9-0无创显微缝合线作端端吻合,共缝合外膜6针,缝合后取羊膜软组织填充材料包裹大鼠坐骨神经缝合口,所有大鼠坐骨神经显微缝合尽可能保证对合、打结松紧度一致并由同一人操作完成,后采用4-0丝线缝合皮肤,碘伏涂擦缝合口,阿米卡星洗剂局部应用。放回饲养笼中。24只大鼠作为对照组:此24只SD大鼠手术方法与实验组手术方法相同,但是将断伤神经缝合完后不包裹防粘连材料,直接对外层切口进行缝合。2检测方法:两组SD大鼠分别于术后20、30、40天麻醉成功后沿原切口处切开皮肤,大体观察坐骨神经及周围组织,根据神经与周围组织形态学观察整体粘连程度评级分类,进行统计评价。并在对坐骨神经行电生理检查后,对坐骨神经组织于光镜及透射电镜下观察。结果:术后6天左右实验大鼠患侧伤口基本愈合,两组SD大鼠实验侧下肢坐骨神经切断后,患侧后爪出现跖屈位且完全不能主动背屈。1周左右所有大鼠患侧下肢出现肿胀,部分大鼠出现足趾脱落或者皮肤溃疡,皮肤溃疡持续时间长,愈合困难。此种失神经性营养不良的皮肤表现在实验组与对照组的发生率没有明显的差异。对照组神经与周围组织粘连重,神经活动度差,取材点神经已经与周围肌肉组组织完全粘合,分离困难;实验组修复段神经与周围组织界限清楚,有少量细丝样粘连,粘连组织较易分离,神经活动不受限。羊膜软组织填充材料在神经上包裹完好,没有明显的降解迹象,材料与周围肌肉组织很容易分离,没有明显的粘连迹象;术后实验组坐骨神经诱发电位的波幅的恢复率比对照组较高,且差异有显著性意义;潜伏期的延迟率与对照组相比有所降低,潜伏期及波幅测得数值随时间呈动态变化,且差异有显著性意义。组织学观察到神经修复处包裹的防粘连材料清晰可见,材料与神经,材料与周围组织的分界明显,炎症反应较轻。再生纤维排列较整齐,神经内无明显结缔组织增生。对照组的神经外膜较厚,成纤维细胞和大量纤维组织形成,缝合口处结缔组织增生明显。损伤神经缝合口远端组织电镜下观察实验组与对照组髓鞘的表现。两组神经细胞髓鞘镜下数量没有显著差异。对照组可见髓鞘融合、肿胀。轴索内线粒体融合、消失。实验组镜下可见髓鞘分离、融合,有增生。轴索内可见髓鞘脱落,轴索内的线粒体融合,线粒体脊消失不清,较对照组镜下表现重。结论:1应用羊膜软组织填充材料包裹修复受损的神经,可防止瘢痕增生有效预防神经与周围组织发生粘连,避免对神经的压迫。2羊膜软组织填充材料具有一定通透性,能起到屏障作用,而且不会影响神经愈合所需的营养。3具有良好的生物相容性,吸收后不残留永久异物,羊膜软组织填充材料所形成的再生室对神经恢复起到了促进作用。
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