突触素和苔藓纤维在液压损伤大鼠外伤后癫痫发生中的作用

来源 :石河子大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:lz274458795
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目的:1、通过对液压损伤后大鼠行为学和脑电图的研究,以分析其在外伤后癫痫中的研究价值。2、通过对液压损伤后突触素和苔藓纤维在外伤后癫痫和非癫痫大鼠大脑内变化的研究,以探讨外伤后癫痫的发病机制。方法:1、液压损伤大鼠外伤后癫痫动物模型的建立:参照D’Ambrosio提出的液压损伤建立大鼠外伤后癫痫动物模型。2、实验分组:58只大鼠随机分为:①对照组(A组)8只(予以实验组大鼠相同的手术操作,但不给打击),②实验组(B组)50只,用液压装置制成颅脑损伤动物模型,存活的大鼠进行3个月行为学和脑电图观察、记录,有癫痫发作的归为癫痫组(C组),余为非癫痫组(D组),③自身对照组:取大鼠相对应的右侧大脑为自身对照标本,分3组:E组(A组右侧),F组(C组右侧),G组(D组右侧)。观察记录结束后处死大鼠,取损伤区及相应对侧皮质内的脑组织行突触素免疫组化学和海马内苔藓纤维Timm染色。3、样品采集与检测:大鼠腹腔麻醉后,经左心室-升主动脉插管,室温下灌注生理盐水(4℃)150ml,随后依次灌注4%多聚甲醛的PBS(0.01mol/L,pH7.4,4℃)液200ml,0.4%硫化钠的PBS(0.01mol/L,pH7.4,4℃)液200ml。2小时后取出大脑,用4%多聚甲醛固定液固定24h(PH 7.0,4℃),沿视交叉后缘作冠切,后部分放入30%蔗糖过夜沉底,冰冻切片, Timm染色;前部分用4%多聚甲醛固定液固定,一周后常规脑组织脱水、透明、石蜡包埋,冠状切片,突触素免疫组化染色。结果:在液压损伤(死亡率38.0%)后存活的31只大鼠中有11只出现癫痫,发生率35.5%。癫痫的发作形式表现为面肌痉挛、点头样运动、四肢抽搐、翻转跳起等。液压损伤后1~2月内为癫痫发生的高峰期。癫痫发作时同期脑电图可见癫痫样放电。液压损伤后部分非癫痫大鼠脑电图表现为1-5导联波幅增高、频率增快。突触素在皮质损伤区表达癫痫组高于非癫痫组(P <0.05),苔藓纤维出芽在癫痫组损伤侧CA3区始层明显增多(P <0.05)。结论:液压损伤外伤后癫痫动物模型与临床外伤后癫痫相似,与其它外伤后癫痫动物模型相比,更具有研究价值;突触素和苔藓纤维与液压损伤外伤后癫痫的发生发展有关。
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