背景及目的:　　肺癌是我国发病率及死亡率最高的恶性肿瘤，其五年总的生存率约10％-15％。绝大多数的死亡来源于恶性肿瘤细胞的分裂增殖，侵袭、浸润和扩散转移。研究证实那些复发转移的瘤细胞表型、基因表达谱和原发灶相似，因此循环肿瘤细胞可作为一种原发肿瘤为代表的“活检液态标本”为非小细胞肺癌患者临床实施实时、无创性检测提供了宝贵资源。监测循环肿瘤细胞(circulatingtumor cells，CTC)有助于早期发现恶性肿瘤微转移、监测术后复发、评估疗效、判断预后，指导临床个体化治疗。　　然而CTC属异质性，在外周循环血及骨髓中属稀有细胞，极不易检出，这就迫切需要一种特异的、敏感的方法去检测这些细胞。目前常用的方法包括“CellSearchTM”系统、免疫磁性分离技术(IMS)、激光扫描细胞计量技术(LSC)、逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、密度梯度离心法、流式细胞术(FCM)、膜滤过法(ISET)等。这些方法步骤复杂，依赖于肿瘤细胞的特性，受离心时间、温度等多种因素影响，敏感性差，假阳性及假阴性率高，无法进行细胞形态学观察、计数和细胞功能的评价。　　复制选择性溶肿瘤病毒是随着人们对肿瘤和病毒分子生物学研究的深入了解和分子生物学技术的发展，用基因工程方法改造野生型病毒或先天性嗜肿瘤的病毒株。利用其对靶肿瘤细胞亲嗜性强，而对其它正常细胞如“白细胞、淋巴细胞、纤维组织细胞”无亲嗜性特点，通过在被感染的肿瘤细胞中的复制高表达GFP蛋白，精确地计数并观察CTC。这种方法方法简便、快捷、高效、特异性强不依赖肿瘤细胞表面标识物，可用于血液中所有恶性实体肿瘤细胞的检测。最重要的是可以发现具有高度活力、高度转移潜能的肿瘤细胞。本课题正是利用复制选择性腺病毒载体（Ad11-5ETel-GFP）这种特性，应用于临床检测非小细胞肺癌循环肿瘤细胞(circulating rumor cells，CTC)，评价非小细胞肺癌的循环肿瘤细胞的临床应用价值，以期其可以作为新方法进行实验研究及临床推广。　　材料和方法:　　56例非小细胞肺癌（男性36例，女性20例，其中鳞癌25例，腺癌19例，腺鳞癌12例）;复制选择性腺病毒载体(Ad11-5ETel-GFP)由郑州大学中英分子肿瘤学研究中心构建和纯化;采集初诊治疗前、化疗结束后的外周静脉血液，均使用抗凝管采集清晨空腹血7.5ml;结果判定采用荧光免疫确认肿瘤细胞。对每份样品以“有或无”CTC为标准分组，对检测有CTC的计数值作为肿瘤负荷，做相关性研究。然后结合患者年龄、性别、病理类型、临床分期以及患者化疗前后CTC计数变化、影像学的变化，化疗的疗效进行分析、预测、评价。　　结果:　　1、构建的Ad11-5ETel-GFP可用于检测血液循环中的肿瘤细胞，它可以特异性识别、感染、靶向肺癌外周循环肿瘤细胞，且最大限度的保存了分离细胞的生物学活性，临床回收率高，重复性好，是一种简便、高效检测CTC新方法。　　2、Ad11-5ETel-GFP感染的循环肿瘤细胞，当病毒浓度为105pfu/cell，37℃孵育24h，GFP表达的阳性率与阳性强度最高，　　3、循环肿瘤细胞(Circulating tumour cells，CTC)计数可初步反映患者的疾病状态。它与肿瘤患者的临床分期、组织类型有关，而与患者年龄、性别、组织分化程度、淋巴结转移等无关。　　4、循环肿瘤细胞(Circulating tumour cells，CTC)与肿瘤标志物CEA、CA125、CYFRA21-1、SCC可能存在一定相关性。　　5、CTC数目评价与RECIST的疗效评价无差异，具有一定吻合度，呈负相关。NSCLC患者的化疗疗效可以通过检测CTC计数来预测，相比RECIST评价更能反映患者病情的微观变化和肿瘤转移特征，具有前瞻性、简便性和可重复性的优点，有利于NSCLC患者的个体化治疗。　　6、在非小细胞肺癌患者中循环肿瘤细胞(CTC)计数平可作为监控和调整治疗及判断预后的依据。对其生存率有预测作用，其准确性可能较传统的影像学诊断评价好。　　结论:　　复制选择性溶肿瘤腺病毒可用于检测血液循环中的肿瘤细胞，它可以特异性识别、感染、靶向肺癌外周循环肿瘤细胞，且最大限度的保存了分离细胞的生物学活性，临床回收率高，重复性好，是一种简便、高效检测CTC新方法。在非小细胞肺癌患者中循环肿瘤细胞(CTC)计数平可作为监控和调整治疗及判断预后的依据。对其生存率有预测作用，其准确性可能较传统的影像学诊断评价好。