基于鲁米诺电化学发光纳米材料和核酸信号放大策略构建microRNA生物传感器

来源 :西南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shyan
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
电化学发光(ECL)技术具有灵敏度高,背景信号低,操作要求低和光学设置简单等优点,在分析传感领域引起持续的关注与研究。作为分析检测中灵敏度较高的一种手段,ECL技术近年来被广泛应用于生命科学方面的探究。目前研究人员用于提高ECL对靶标分析灵敏度的方法可归纳为以下两点:(1)探索新型的ECL材料以提高其发光强度;(2)结合信号放大策略实现对目标物的有效响应。因此,本论文开发新型基于鲁米诺的复合材料作为ECL发射体并结合高效的DNA纳米机器核酸信号放大策略实现对肿瘤靶标的灵敏检测。以下为论文的几个主要部分:第1章简要概述了电化学发光技术,详细介绍了电化学发光几种不同类型的反应原理及应用。本章对部分核酸检测方法的发展及其在电化学发光生物传感器中的应用作了评述。此外,本章还介绍了以鲁米诺为发光材料构建的生物传感器对micro RNA-21检测的相关工作。第2章基于氨基修饰的3,4,9,10-苝四羧酸二酐/鲁米诺(PTC-NH2/Lu)纳米复合材料和双足DNA步行器信号放大策略构建了ECL生物传感器实现对micro RNA-21(mi RNA-21)的超灵敏检测。PTC-NH2/Lu纳米复合材料通过π-π堆积分子组装方法制备并作为信号标签,其中PTC-NH2作为新型的共反应促进剂显著增强了鲁米诺-过氧化氢体系的ECL信号强度。此外,目标mi RNA-21触发产生的双足DNA步行器可以通过支点链置换反应(TSDR)对信号进行有效的放大。因此,本工作中制备的ECL生物传感器实现了对mi RNA-21的超灵敏检测,其检测的线性范围为100 amol/L到100 pmol/L,检测限为33 amol/L。同时,该生物传感器还成功应用于检测人体癌细胞裂解物中的靶标mi RNA-21。从结果可以看出,这项工作不但构建了一个新的信号放大平台而且其在生物医学分析和早期临床诊断中展现了巨大的应用潜力。第3章通过将鲁米诺和二硫化钼量子点(Mo S2 QDs)同时固定在金属有机骨架ZIF-8中,制备了带正电荷的纳米复合材料Lu/Mo S2 QDs@ZIF-8,其中鲁米诺和Mo S2 QDs分别作为发光体和共反应促进剂参与ECL过程。ZIF-8中丰富的金属离子被证明是相对独立的反应位点与鲁米诺配位。同时,ZIF-8中分布的空腔骨架为嵌入Mo S2 QDs提供了狭窄但密集的空间。因此,纳米复合材料能够固载大量的发光体和共反应促进剂于ZIF-8骨架中。在施加电压的情况下会有更多的超氧阴离子自由基(O2·-)生成并与鲁米诺反应。另外,带正电的纳米复合材料促进了电极表面和空腔中O2·-的富集。同时,狭窄的腔体大大减少了O2·-与鲁米诺之间的反应距离,从而显著提高了三元ECL系统的发光效率。值得注意的是,集成的纳米复合材料实现了很强的ECL现象,并且计算的鲁米诺的ECL效率是二元体系鲁米诺-过氧化氢体系中鲁米诺ECL效率的12.7倍,而与已经发表的仅能提高1.5-4倍ECL效率的传统三元系统相比,该体系在很大程度上实现发光体ECL效率的突破。此外,以Lu/Mo S2 QDs@ZIF-8作为ECL材料,基于内源性ATP驱动的核酸信号放大策略构建了ECL生物传感器。该策略实现了对mi RNA-21的超灵敏检测,检测限低至14.6 amol/L。这项工作不仅为肿瘤的早期临床诊断提供了监测平台,而且更重要的是,还提出了可以应用于提高其他体系中发光体ECL效率的通用途径。
其他文献
构造煤是煤体原生结构遭受构造作用破坏的煤,并且具有结构面网络复杂、结构松散、力学强度低等特性。近年来,构造煤中煤层气开发工程得到重视,因此对于构造煤的力学性质以及在细观尺度上变形破坏问题的深入研究具有重大意义。然而,由于现场原位测试无法开展、取样困难、室内试验仪器适用条件等限制,在实际操作过程中很难直接测试得到构造煤的基本力学性质。此外,在实验室条件下构造煤样本裂隙和变形的实时监测难以实现,从而限
随着运输距离的增长以及人们对生活品质要求的提高,在对一些饮料、啤酒和药品包装时,单层PET的阻隔性能尚不能满足产品的货架期要求。为了提高单层PET包装材料的阻隔性,可降解、可再生和绿色环保的生物聚合物被认为是高阻隔PET包装的涂层材料受到广泛关注。本研究将乳清分离蛋白(Whey Protein Isolate,WPI)、壳聚糖(Chitosan,CS)和微晶纤维素(Microcrystalline
毛竹(Phyllostachys edulis)是我国最重要的林产品和非木材森林资源之一,是一种具有很高经济、生态和社会价值的大型木本竹,在经济发展和自然环境保护方面均有重要地位。对毛
失眠严重降低人们的生活质量,并且失眠会引起多种精神性疾病,如抑郁、焦虑等。因此,对失眠患者治疗的研宄具有非常重要的意义。目前以GABAa受体为靶点的药物均有明显的副作用。因此开发一种没有副作用,治疗效果专一的药物非常必要。目前研究发现多种G蛋白偶联受体与睡眠相关。中药是我们防病、治病及养生保健的重要物质基础,几千年来,传统中医药为中华民族的繁衍昌盛做出了巨大的贡献,在中药中分离得到的天然产物一直是
可再生能源在世界范围内的重要性日渐增强,西欧有些国家大力支持能源转型,越来越多的欧盟成员国使用间歇性可再生能源发电,这成为推动电力行业整合发展的重要因素。“五边论坛”的成立是欧盟迈向市场一体化的重要一步,同时也为区域合作提供了实例。该类英语文献的汉译对我国的能源转型具有重要的借鉴意义。本翻译实践报告的翻译内容选自2018年由施普林格自然出版机构出版的《可再生能源和能源联盟的核心:五边论坛是如何促进
美国总统大选作为重大政治事件,历来受到全美乃至全球人民的极大关注。电视辩论是候选人展示政治才干及执政能力的平台,旨在向选民传达政治主张、赢得支持。总统候选人通过电
目的本实验运用高效液相色谱-质谱联用法(LC-MS/MS)研究精神分裂症和双相情感障碍患者血浆中同型半胱氨酸含量和其代谢通路中上下游代谢物含量,并探讨分析三种代谢产物含量变化差异与精神类疾病的联系,进而为发现新的诊断标志物奠定前期基础。方法分析了沈阳市精神卫生中心临床质谱中心在2018年6月-2019年6月期间采用高效液相色谱-质谱联用法(LC-MS/MS)开展同型半胱氨酸代谢通路检测的三组患者数
随着无线网络技术的迅速发展,民用飞机机载信息域在机场环境下,使用Gatelink与机场Wi Fi连接,实现与机场及航空公司专网的通信。为保证“飞机-地面”连接的安全性,实现民用飞机机载信息域与航空公司网络设施间的安全通信,Gatelink引入了可扩展认证协议。可扩展认证协议(EAP)是一种广泛使用的身份验证框架,提供了多种认证子协议,在为Gatelink提供安全认证服务的同时,也面临诸多安全威胁。
初中动点问题作为中考数学中的压轴题,常以综合性强、方法灵活、知识点多著称,但教学实践发现,大多数初中生解决动点问题时常会出现畏难情绪和心理障碍。变式教学作为中国传统的教学特色,为单一的课堂模式提供多样性。本文尝试将变式教学模式运用于动点问题中,由复杂的条件变式逐步细化为简单的条件变式,以简驭繁,帮助学生提高动点问题解题能力的同时,为动点问题教学注入新的营养成分,使教学过程展现全新活力。本文利用文献
研究背景:自体脂肪移植是将自身脂肪组织通过某种吸脂方式取出,经过体外的一系列纯化处理后,再重新回植于同一个体体内以达到治疗组织缺损凹陷、发育不良等目的的一种临床技术。由于自体脂肪无免疫排异、易获得性、可重复性和兼有塑形作用等优点,在整形修复中,特别是面部的整复中,自体脂肪移植无疑拥有良好的前景。但从目前国内外的报道来看,自体脂肪移植并非绝对安全。由于脂肪处理纯化、术中操作手法不当等问题导致自体脂肪