目的：观察1型糖尿病大鼠不同时期，第四脑室外侧隐窝室管膜细胞的形态学变化，以及该处室管膜细胞内NF-κB变化规律和nNOS阳性细胞的分布情况。探讨该部位在糖尿病发病过程中的变化和意义。　　 方法：选择健康雄性Wistar大鼠，体重190g-220g，随机分为四组：正常对照组、造模2周组、造模4周组、造模8周组；各组选取20只动物进行光镜、电镜、NF-κB免疫组化和NADPH-d组化观察，对实验结果进行统计学分析，观察各组相互间的关系。　　 1、1型糖尿病大鼠模型制备：动物于诱导前禁食、不禁水12小时后，用药组动物予以一次性腹腔注射链脲佐菌素60mg/kg，制备1型糖尿病动物模型；对照组动物给予一次性腹腔注射无菌柠檬酸/柠檬酸钠缓冲液。　　 2、石蜡切片标本制备：10％水合氯醛麻醉，常规经心灌注、固定、取材，冠状方向去除小脑以前部分，取包含第四脑室外侧隐窝的脑块，常规脱水、透明、浸蜡、包埋、切片。常规HE染色、NF-κB免疫组化染色、封片。显微镜观察、照相。　　 3、电镜标本制备：麻醉、灌注同石蜡切片标本制备，但灌注液为含2％多聚甲醛和2.5％戊二醛的混合磷酸缓冲液。取包含第四脑室外侧隐窝的脑块用PBS冲洗，梯度酒精脱水，叔丁醇置换，真空干燥、喷金，日立S3500N扫描电镜观察、照相。透射电镜样品制备与扫描电镜样品制备相同，取包含第四脑室外侧隐窝的脑块，放入4％戊二醛固定，1％锇酸后固定，树脂包埋，切片，电子染色，T-S7500透射电镜观察、照相。　　 4、冰冻切片制备：麻醉、灌注、取材同石蜡切片标本制备。样品块依次在15％和30％的蔗糖磷酸缓冲液中浸泡至沉底，冰冻切片机切片，切片厚度为40um;清洗，1％的TritonX-100室温下浸浴；移入孵育液孵育；再清洗后明胶载片捞片；裱片；风干；中性红复染；常规脱水透明;中性树胶封片；观察照相。　　 5、统计学处理：NF-κB阳性细胞采用麦克奥迪数码医学图像分析系统(Motic Med6.0)测定平均光密度值。数据用均数加减标准差(x-±s)表示。应用SNK-q检验，进行两两比较，以P＜0.05为有显著性差异。　　 结果：　　 1、大鼠在造模前血糖值低于8.9mmol/L，一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)造模5天后血糖值＞16.7mmol/L，提示糖尿病动物模型制备成功。　　 2、光镜及NF-κB免疫组织化学观察结果　　 2.1对照组：第四脑室外侧隐窝室管膜细胞呈单层排列，胞体呈矮柱状或立方形，大小规则，排列均匀整齐，胞核呈椭圆形或圆形；NF-κB免疫细胞胞核不表达，胞浆呈浅棕黄色。该区域平均光密度值为169.89±3.00。　　 2.2模型组：造模2周组，室管膜细胞排列疏密不等，胞体大小不均，胞核梭形或椭圆形；NF-κB仍仅表达在细胞胞浆，染色呈浅棕黄色；胞核无表达。该区域平均光密度值为177.46±2.05。造模4周组，室管膜细胞排列密集且呈凹凸不平的波浪样，局部呈双层排列，表面纤毛密集，细胞核多样性，排列不整齐；NF-κB表达在胞核，阳性细胞胞核呈深棕褐色；胞浆呈弱阳性。该区域平均光密度值为181.43±2.43。在造模8周组，室管膜细胞单层排列且稀疏，细胞胞体形态扁平，细胞核呈梭形，脑室面纤毛稀疏；NF-κB免疫组化染色胞核表达消失；细胞胞浆染色浅棕黄色。该区域平均光密度值为177.21±2.30。结果显示，糖尿病室管膜细胞NF-κB免疫阳性细胞平均光密度值，模型组和对照组有显著性差异；造模4周组与造模2周组、造模8周组比较均有显著性差异；造模2周组与造模8周组无显著性差异。　　 3、扫描电镜观察结果　　 3.1对照组：低倍镜下观察显示，第四脑室外侧隐窝从入口到出口为沿小脑中脚下方向外延伸，越过下脚向腹侧延伸形成的弯曲管状结构，局部隆起。高倍镜下观察显示，此处室管膜细胞结构规整，轮廓清晰，胞体呈梭形或多边形，游离面有丰富丛密的纤毛；纤毛之间可见微绒毛。室管膜细胞表面可见少量散在的球形分泌颗粒，表面光滑，大小不等，室管膜上纤维少见。　　 3.2模型组：造模2周组室管膜细胞整体轮廓不清晰，凹凸不平，纤毛丛密且排列紊乱，分泌物呈颗粒状，密集、大小不等、形态不规则，多呈片状或团状分布，分泌物表面有的光滑、有的粗糙或有皱褶；紧贴室管膜细胞上皮表面或纤毛根部可见有梭形膨体的单根纤维，该纤维分支少见。造模4周组室管膜细胞纤毛排列紊乱，局部稀疏粘连成缕；微绒毛稀疏，有的区域无微绒毛；分泌物多呈球形颗粒，多呈团状或片状分布，偶见散在分布的分泌颗粒；此时期室管膜上纤维多见，分布较广，纤维可分为两种：一种纤维较粗大，宽扁不等，长短不一，有分支，呈片状、束状或网状，多位于纤毛表面；另一种纤维较纤细，粗细均匀，表面光滑有少量梭形膨体，呈圆柱状；贴于室管膜细胞的表面，穿行于纤毛之间；该纤维分支少见但交织呈网状，分布较密集。造模8周组整体观察室管膜细胞轮廓及边界不清晰，纤毛和微绒毛稀疏，分泌物多呈球形散在分布，偶见纤细的室管膜上纤维。　　 4、透射电镜观察结果　　 4.1对照组：室管膜细胞排列整齐，游离面纤毛和微绒毛丰富，边界清楚，细胞间多见缝隙连接。胞浆内线粒体多见于细胞核的两侧及游离面，溶酶体少见。　　 4.2模型组：在造模4周组，室管膜细胞体积大小不等，细胞游离面纤毛、微绒毛丰富，胞核多呈椭圆形或圆形，偶见皱缩，染色质深染边集；胞浆内线粒体数目较多，分布密集，有的线粒体内可见空泡现象；溶酶体多见，形态多样，且溶酶体内有形态不同、染色深浅不一的颗粒；胞浆内可见大量的游离核糖体；粗面内质网上核糖体排列不规则，且染色深浅不一。　　 5、NADPH-d组化染色观察结果　　 5.1对照组：室管膜细胞呈排列规则，但nNOS阳性细胞、nNOS阳性纤维少见。　　 5.2模型组：第四脑室外侧隐窝的入口处，可见室管膜内nNOS阳性细胞，胞体呈球形，胞核淡染清晰可见，胞质深染呈紫蓝色，多有1-2个条索状突起深入到室管膜下层；室管膜下nNOS阳性细胞较多，常呈3-4个聚集排列，胞体呈圆形、梭形或锥形，胞体常发出1-3个突起，多平行室管膜走形。室管膜下多见深蓝色的点状颗粒，排列密集；在点状颗粒之间还见深蓝色nNOS阳性纤维，多纤细与室管膜平行走行。　　 结论：　　 1、成功制备糖尿病大鼠模型。　　 2、扫描电镜下观察到造模4周组室管膜细胞表面有大量分泌物及室管膜上纤维，与其他组有明显的差别。　　 3、透射电镜下造模4周组室管膜细胞胞质内多见溶酶体及大量游离核糖体，线粒体可见空泡状改变。　　 4、造模4周组NF-κB表达在胞核呈强阳性，胞质弱阳性；在造模2周和8周组NF-κB表达在胞质呈弱阳性表达，胞核不表达。