生物素标记结合双向电泳对嗜热四膜虫接合相关的细胞表面蛋白的研究

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嗜热四膜虫是一种单细胞的纤毛虫,它的有性生殖通过两种不同接合型的细胞间的接合完成。接合是一个复杂的过程,它的最初阶段涉及细胞表面分子的相互识别。四膜虫的接合可以通过饥饿来诱导,分析四膜虫饥饿前后细胞表面蛋白的变化,有可能捕捉到控制四膜虫接合行为的相关蛋白。本实验用生物素化试剂NHS-LC Biotin标记嗜热四膜虫的细胞表面蛋白,然后通过SDS-PAGE和双向电泳来分析饥饿前后四膜虫细胞表面蛋白的变化,同时也分析了饥饿前后四膜虫纤毛膜蛋白的变化。实验结果表明,四膜虫经过饥饿处理后,细胞表面一分子量为50kd左右的多肽的电泳条带明显变宽。在饥饿后的四膜虫的纤毛蛋白的双向电泳图谱中,66kd附近比未饥饿处理的多出了几个多肽的斑点,这些多肽的分子量相同,等电点不同。推测四膜虫饥饿后细胞表面的和纤毛膜的蛋白经历了某些修饰。50kd和66kd的多肽在嗜热四膜虫接合中的作用有待更深入的研究。
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