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目的:种植义齿修复缺失牙,以其良好的效果,正成为一种重要的修复方法,日趋广泛地应用于临床。但由于缺牙后牙槽骨萎缩或吸收所致骨量不足,给种植义齿的设计和应用造成一定的难度。传统植骨增加骨量的方法有多种弊端,引导骨再生术(guided bone regeneration, GBR)作为一种新型促骨再生技术, 是生物材料科学与临床治疗学有机结合的产物,它巧妙地利用膜状植入材料所具有的保护、阻隔、引导功能,充分调动组织自身的愈合潜力,最终达到理想的组织再生和重建。在骨组织的修复过程中,成骨细胞与促进其生长和分化的细胞因子起着重要作用。为初步探讨屏障膜与二者结合后在牙槽骨缺损修复领域的应用潜能,本研究在体外分离培养犬骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells, BMSCs),观察其成骨细胞表型特征,将其与可吸收胶原膜复合后植入牙槽骨缺损区,覆盖引导骨再生膜;将体外分离的含多种生长因子的富血小板血浆(platelet-rich plasma, PRP)植入牙槽骨缺损区,覆盖引导骨再生膜,比较这两种方法与单纯应用引导骨再生膜在成骨作用上的不同。本研究包括两部分。方法:(1)细胞培养:采用犬来源的BMSCs体外扩增培养,观察检测非诱导条件下BMSCs的生长变化和成骨分化。(2)动物实验:拔出三只雄性杂种犬的双侧上下颌第一、二前磨牙,保留唇舌侧牙槽嵴,制备一近远中向15×5mm,冠根向8mm的骨内缺损,随机分四组予以下处理:(A) 空白对照组:直接缝合牙龈,(B) 单纯膜组:骨缺损区上覆盖Bio-Gide?膜后缝合牙龈,(C)膜+BMSCs:缺损区植入自身BMSCs-BME-10X?复合物,细胞朝向骨面,覆<WP=5>盖Bio-Gide?膜后缝合牙龈,(D)膜+PRP组:缺损区注入自身PRP 0.5ml,覆盖Bio-Gide?膜后缝合牙龈。分别于术后4、8、12周随机取材,进行大体、X线和组织学检测。结果:(1)形态学观察表明,BMSCs贴壁细胞呈集落生长,有成纤维细胞样外观,未加入成骨诱导剂,细胞形态发生变化,钙沉积出现,碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)表达。3代内扩增的BMSCs有成骨活性,原代细胞成骨活性优于传代后细胞。(2)动物实验表明,盖膜各组较空白对照组在8周内有明显的骨形成,但Bio-Gide?胶原膜加用BMSCs或PRP与单纯应用胶原膜在促进骨形成上未见明显区别。结论:(1) BMSCs在体外培养能大量扩增,具有自然向成骨细胞分化的能力,是骨组织修复理想的细胞来源。本实验所培养的BMSCs具有骨祖细胞特性。(2)使用Bio-Gide?胶原膜进行引导骨再生术(GBR)可促进成骨,将骨自然修复时间缩短为2月,在临床骨缺损修复上有良好的应用前景;GBR单独及与BMSCs或PRP复合应用的差异不明显,提示二者与GBR的联合应用还有待进一步研究。