仔猪肠源乳酸菌的筛选及与纳米氧化锌联合应用的研究

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仔猪断奶后由于营养应激、环境应激和心理应激,导致仔猪食欲匮乏,肠黏膜形态结构和功能受损,胃肠道微生态菌群紊乱,发生腹泻等多种疾病,生长受阻甚至失常,常被称为“早期断奶综合症”。本文从健康仔猪粪便中分离获得一株植物乳杆菌BLPL03,并对其进行了耐受能力(耐酸、耐胆盐和抗生素敏感性)和益生性能(抑制致病菌能力、抑制致病菌黏附肠上皮细胞Caco-2)的研究。实验结果表明,植物乳杆菌BLPL03能够在pH 2.5的MRS培养基中存活6 h,在含0.45%胆盐MRS液体培养基中菌体能存活12 h,这表明其能耐受胃肠道中酸性和胆盐的胁迫。植物乳杆菌BLPL03对部分抗生素敏感(如:阿莫西林,红霉素,氯霉素,氨苄西林,头孢呋辛),部分抗生素耐受(如:链霉素,庆大霉素,卡那霉素四环素,环丙沙星,恩诺沙星,多粘菌素B)。植物乳杆菌BLPL03能够拮抗4种致病菌(单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门氏菌和大肠杆菌),其中对鼠伤寒沙门氏菌的抑制作用最强,其次为大肠杆菌、单增李斯特菌和金黄色葡萄球菌。通过平板计数法和RT-PCR技术探究了纳米氧化锌与植物乳杆菌BLPL03发酵液体内和体外的抑菌性能。实验结果表明,纳米氧化锌与植物乳杆菌BLPL03发酵液混合物比单独的纳米氧化锌对鼠伤寒沙门氏菌的抑制效果更强。此外,通过RT-PCR方法对小鼠肠道菌群数量变化的分析,实验结果表明,纳米氧化锌与植物乳杆菌BLPL03发酵液混合物能增加小鼠肠道微生物菌群丰度,对致病菌具有协同抑菌性。通过对断奶仔猪饲喂纳米氧化锌和植物乳杆菌BLPL03的混合液,探究其对断奶仔猪生长性能及健康状况的影响;结果显示,饲喂纳米氧化锌与LFL混合液可以有效提高断奶仔猪的平均日增重,降低料肉比,降低腹泻率,促进断奶仔猪生长,改善其健康状况;血清中肝功能指标分析结果显示,饲喂纳米氧化锌与LFL不会引起仔猪肝脏的损伤,并可促进仔猪生长;RT-PCR结果显示,乳杆菌属和双歧杆菌属在饲喂纳米氧化锌和LFL的仔猪肠道占据优势地位。综上所述,植物乳杆菌BLPL03能够在体外抑制致病菌的生长,菌体在酸性和高胆盐环境中生存情况良好,其发酵液与纳米氧化锌联合应用在体内外都可抑制致病菌的生长;同时还能有效调节肠道菌群,提高肠道中有益菌群的数量;且饲喂断奶仔猪可以促进仔猪的生长,降低腹泻率,改善其健康状况。因此,本论文为纳米氧化锌与植物乳杆菌在养殖业中的应用提供了基础数据及应用参考。
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