背景:哮喘是气道慢性炎症性疾病，其病理生理特征主要包括气道高反应和气道重塑。气道重塑是气道在炎症因子的刺激下，发生的气道壁结构的改变，主要包括细胞外基质（extracellular matrix，ECM）的沉积;气管平滑肌细胞(airway smooth muscle cells，ASMCs)增殖和肥大;气道上皮细胞(airway epithelial cell，AEC)的破坏和杯状细胞的增生等。结缔组织生长因子（connective tissue growth factor, CTGF）是近年发现的转化因子-β(transforming growth factor-β，TGF-β)下游作用因子，具有促进细胞增殖、ECM的沉积、血管生成、介导细胞粘附、刺激细胞迁移等作用;抑制其活性可有效减少ECM的沉积、细胞增殖及气道重塑作用，这可能会成为治疗支气管哮喘的有效方法。　　目的:制备抗结缔组织生长因子单链抗体(single-chain Fv antibody，scFv)二聚体，并鉴定其生物活性;观察其对人气管平滑肌(ASM)细胞增殖的影响以及初步探讨可能的作用机制。　　方法:构建pET28a-scFv-matrilin表达质粒，并转化到Ecoli.BL21(DE3)感受态细胞中，IPTG诱导表达融合蛋白scFv-matrilin，经过镍柱亲和层析得到抗CTGF单链抗体-matrilin融合蛋白二聚体，SDS-PAGE、Native-PAGE电泳检测其纯度，ELISA法检验其免疫学活性。CTGF干预人气管平滑肌细胞，以MTT法检测气管平滑肌细胞增殖情况。用scFv二聚体与人气管平滑肌细胞共孵育后，通过RT-PCR检测各组细胞中mTOR mRNA的表达水平，Western Blot检测scFv二聚体对HASMCs的p-Akt、p-mTOR表达的影响。　　结果:SDS-PAGE、Native-PAGE电泳显示经过亲和层析得到的抗CTGF单链抗体二聚体纯度在90％以上，ELISA实验表明抗体能够与CTGF特异性结合;CTGF可促进入气管平滑肌细胞增殖;RT-PCR检测显示，CTGF对人气管平滑肌细胞的mTOR上调表达作用能够被抗CTGF单链抗体二聚体所抑制;Western Blot结果显示，抗CTGF单链抗体二聚体可抑制人气管平滑肌细胞Akt及mTOR的磷酸化。　　结论:我们制备了纯度较高的且能够与CTGF特异性结合的抗CTGF单链抗体二聚体，这种单链抗体二聚体能够抑制人气管平滑肌细胞增殖;推测这种效应的机制可能是通过PI3K/Akt/mTOR信号通路实现的。