长链非编码RNA ENST00000460164在人乳腺癌中的表达分析及其生物学功能研究

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目的 本实验旨在明确 lncRNA-ENST00000460164 在人乳腺癌组织中的表达水平并探究其与乳腺癌之间的关 系。研究ENST00000460164 在乳腺癌中潜在的生物学功能及其作用;对临床诊断或治疗乳腺癌提供新的思路和方法。方法 我们运用qRT-PCR的方法检测 ENST00000460164 在 32 对配对的三阴性乳腺癌(TNBC)及114例配对的不同亚型的乳腺癌和癌旁组织中的表达。采用配对T检验和Spearman 相关性分析 ENST00000460164 与发病年龄、肿瘤大小等因素之间的关系。根据芯片检测得到的数据;利用线上数据库运算预测ENST00000460164可能参与调控的信号通路及相互作用的靶基因。构建ENST00000460164-shRNA及NC-shRNA质粒并转染到MCF-7细胞中;我们用流式技术和Western Blot方法检测转染后MCF-7细胞周期改变及周期关键蛋白cyclinD1、p16INK4A的表达变化。结果 长链非编码RNA ENST00000460164 在三阴性乳腺癌组织及所有亚型乳腺癌组织中相对高表达于癌旁组织。Spearman分析预测ENST00000460164的表达与ER的表达呈负相关(R=-0.129;P=0.019)。芯片数据运算提示 ENST00000460164 与周期关键蛋白因子有相互作用。在 MCF-7 细胞中敲低ENST0000460164之后;G1期明显延长;S期明显缩短;G1期关键调控蛋白cyclinD1的表达明显降低而p16INK4A明显上调。结论ENST00000460164 在TNBC及BC组织中是表达上调且与ER有关;ENST00000460164 可作为诊断 TNBC 及乳腺癌的生物分子标志物(P<0.05)。在MCF-7细胞中ENST00000460164可能通过参与调控蛋白cyclinD1或者p16INK4A的表达改变细胞周期。
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