益气补肾中药对自然流产模型小鼠CD28、CD152分子、孕酮影响的实验研究

来源 :浙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:u20051026
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目的:将益气补肾中药应用于小鼠自然流产模型,探讨其对模型小鼠脾脏、母胎界面组织CD28、CD152分子的表达情况及外周血孕酮水平的影响,从而探讨益气补肾中药对小鼠妊娠期免疫状态的调节作用。  方法:以CBA雌鼠×DBA/2雄鼠建立小鼠自然流产模型,观察雌鼠阴栓,见阴栓日为妊娠第0天。将孕鼠随机分成4组:空白对照组(生理盐水组):于妊娠第0天开始灌服生理盐水;西药组(环孢菌素A组):于妊娠第4天灌服环孢菌素A(CsA);中药组:于妊娠第0天开始灌服益气补肾中药;中西医结合组:于妊娠第0天开始灌服益气补肾中药,妊娠第4天灌服CsA。妊娠第9天、第14天,分批处死小鼠,取外周血制备血浆,用 ELISA法测孕酮浓度值;取脾脏、母胎界面组织,制成单细胞悬液,采用流式细胞术分析T细胞表面CD28、CD152分子表达情况。  结果:(1)妊娠9天(孕早期),四组外周血孕酮浓度值从高到低:中药组、中西结合组、生理盐水组、西药组。与空白对照组比较,中药组与中西结合组外周血孕酮水平均有高于生理盐水组的趋势,但统计学上无显著性差异(P>0.05)。与西药组比较,中药组外周血孕酮水平明显高于西药组,且统计学上有显著性差异(P<0.05);中西结合组外周血孕酮水平明显高于西药组,且统计学上有显著性差异(P<0.05)。(2)妊娠14天(孕中晚期),四组外周血孕酮浓度值从高到低:中西结合组、西药组、中药组、生理盐水组。与空白对照组比较,中西结合组外周血孕酮水平明显高于生理盐水组,且统计学上有显著性差异(P<0.05);中药组外周血孕酮水平有高于生理盐水组的趋势,但统计学上无显著性差异(P>0.05)。中药组与中西结合组比较,中西结合组外周血孕酮水平高于中药组组,且统计学上有显著性差异(P<0.05)。(3)妊娠9天,①CD28分子在脾脏与母胎界面组织的表达趋势一致,从高到低为:西药组、中西结合组、生理盐水组、中药组。与空白对照组比较,中药组CD28分子在脾脏表达低于生理盐水组,且统计学上有显著性差异(P<0.05);中药组 CD28分子在母胎界面组织表达亦有低于生理盐水组的趋势,统计学上却无显著性差异(P>0.05)。中西结合组 CD28分子表达无此趋势。②CD152分子在脾脏与母胎界面组织表达从高到低均为:中西结合组、中药组、西药组、生理盐水组。与空白对照组比较,中药组与中西结合组 CD152分子在脾脏表达均有高于生理盐水组的趋势,统计学上无显著性差异(P>0.05);中药组CD152分子在母胎界面组织表达高于生理盐水组,且统计学上有显著性差异(P<0.05);中西结合组 CD152分子在母胎界面组织表达亦有高于生理盐水组的趋势,统计学上却无显著性差异(P>0.05)。(4)妊娠14天,①CD28分子在脾脏表达从高到低:生理盐水组、西药组、中西结合组、中药组;在母胎界面组织表达从高到低:生理盐水组、中药组、西药组、中西结合组。与空白对照组比较,中药组、中西结合组CD28分子在脾脏表达均有低于生理盐水组的趋势,统计学上无显著性差异(P>0.05);中西结合组 CD28分子在母胎界面组织的表达低于生理盐水组,且统计学上有显著性差异(P<0.05),中药组CD28分子母胎界面组织表达有此趋势,统计学上无显著性差异(P>0.05)。②CD152分子在脾脏表达从高到低:中西结合组、中药组、西药组、生理盐水组;在母胎界面组织表达从高到低:中西结合组、西药组、中药组、生理盐水组。中药组、中西结合组CD152分子在脾脏与母胎界面组织的表达均有高于生理盐水组的趋势,统计学上却不具显著性差异(P>0.05)。  结论:第一,孕早期及中晚期,益气补肾中药均有升高自然流产模型小鼠血中孕酮水平的作用趋势。第二,孕早期,益气补肾中药对于自然流产模型小鼠有上调CD152分子在母胎界面组织表达的作用与下调CD28分子在母胎界面组织表达的作用趋势。益气补肾中药有下调CD28分子和上调CD152分子在脾脏表达的作用趋势。第三,孕中晚期,益气补肾中药对于自然流产模型小鼠有上调CD152分子在母胎界面组织、脾脏表达的作用趋势和下调CD28分子在母胎界面组织、脾脏表达的作用趋势。第四,实验表明,益气补肾中药可能通过上调CD152分子表达、下调CD28分子表达,在孕早期和中晚期,诱导母-胎免疫Th1/Th2平衡向Th2型偏倚,及升高外周血中孕酮水平,有利于妊娠状态的维持,从而降低自然流产的发生率。
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