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中药郁金为常用传统中药,《中国药典》2010年版收载郁金为姜科(Zingiberaceae)植物温郁金Curcuma.wenyujinY.H.ChenetC.Ling、姜黄CurcumalongaL.、广西莪术Curcuma.kwangsiensisS.G.LeeetC.F.Liang和蓬莪术Curcuma。phacocaulisVal.的干燥块根。前两者分别习称“温郁金”和“黄丝郁金”,其余按性状不同习称“桂郁金”或“绿丝郁金”。具有行气化瘀,清心解郁,利胆退黄的功效。主要用于治疗经闭痛经,胸腹胀痛、刺痛,热病神昏,癫痫发狂,黄疸尿赤等症。现代药理研究表明,郁金具有保护肝细胞、促进肝细胞再生、抗肿瘤、抗菌、抗氧化,降血脂等多种作用。 中药郁金药用史载于唐代《药性论》(公元627~649年)。自《唐本草》(公元659年)起,后世本草书籍对郁金多有记载。中药郁金的收购主要靠外形相似,同株植物的根茎和块根、不同种姜黄属植物郁金的块根在外形上相似,这样就可能导致药材市场销售混乱,多品种混用情况发生,最终郁金的来源由单一品种转为多品种。本课题旨在建立同时鉴别与区分姜黄属小同种郁金及同株来源的莪术与片姜黄的多种分析方法,完善质量控制标准。具体研究内容如下: 1.郁金类药材薄层色谱指纹图谱研究 本课题采用高效薄层色谱法,结合自动点样系统、数码成像系统和薄层色谱扣描仪,对姜黄属不同种郁金之间以及同株来源的郁金、莪术、片姜黄三种药材之间进行定性进别。采用甲醇超声处理,样品直接过滤制备成供试品液,石油醚-乙酸乙酯系统展开,以对二甲氨基苯甲醛为显色剂,105℃加热至斑点清晰,紫外灯366nm和白光检视。结果显示斑点清晰,指纹图谱斑点信息量多,特征性强,可以作为鉴别郁金类药材的薄层色谱指纹图谱。同时建立了薄层生物自显影的方法,从生物活性角度对郁金药材进行评价。对郁金、莪术、片姜黄三种药材进行了溥层色谱比较分析,发现化学显色的方法不易将三者区分开。本试验建立了DPPH-薄层生物自显影的方法,对该三种药材进行鉴别分析,结果良好,此方法是利用具有抗氧化作用的化合物可以清除自由基的原理,进行薄层的分离分析,方法直观,可信度高。 2.顶空气相色谱-质谱联用结合统计学方法用于郁金指纹图谱研究 本课题采用顶空气相色谱-质谱联用(HS-GC-MS)技术对姜黄属四种郁金及市售药材进行了挥发性成分的分析,在所有被检出成分中共鉴定出83种化合物,在此基础上,通过比较分析,建立了郁金类药材的气相指纹图谱,并结合化学计量学的方法对采集的数据进行主成分分析和系统聚类分析,对商品药材进行品种归类。同时,本课题利用相同的气相和质谱条件,对郁金、莪术、片姜黄三种药材进行了挥发性成分的比较分析,目的是用该方法对这三种药材进行区别。本课题所建立的实验方法可以同时用来鉴别不同来源的郁金及同株来源的莪术、片姜黄,适应性强。顶空气相色谱技术,具有节省时间,节省溶剂,方便快捷等特点,且结果准确,方法稳定。 3.高效液相色谱用于郁金品质控制研究 本实验以HPLC-DAD技术为分析手段,以乙腈-0.1%磷酸水为流动相,梯度洗脱。对姜黄属的四种郁金药材进行了HPLC分析,建立了郁金类药材的高效液相指纹图谱,可以较好的区别四种郁金药材。同时,采用相同实验条件对温莪术、片姜黄进行了高效液相色谱的初步比较研究,发现三者在成分组成上既有相同,也有不同。同时,对郁金类药材及莪术、片姜黄中的吉马酮、莪术二酮两种成分进行了含量测定,结果在温郁金中均检测到该两种化合物,在桂郁金、绿丝郁金、黄丝郁金及郁金商品药材中只检测到吉马酮,莪术与姜黄中莪术二酮及吉马酮的含量高于郁金中含量,在某些批次药材中甚至达10倍以上。本实验方法可以较好地作为郁金类药材的鉴别方法。