本实验运用改良毛囊机械分离方法,以山羊背颈部皮肤为标本分离初(次)级毛囊,建立内蒙古绒山羊初级毛囊的37℃、Williams E培养基培养方法,并发现0.4mg /L和10mg /L氢化可的松的促进毛囊生长作用差异不明显;l0 mg/L转铁蛋白对初级毛囊生长有明显的促进作用;10μg /mL牛胰岛素对次级毛囊的生长有明显的促进作用;10ng /mL IGF-1(胰岛素样生长因子1)对次级毛囊的生长有抑制作用;10μg /m L牛胰岛素可降低10ng/m L IGF-1对次级毛囊的生长的抑制作用。采用胶原酶消化和机械撕裂相结合的方法分离内蒙古绒山羊初级毛囊毛乳头细胞,在37℃、5% CO2、饱和湿度下培养建立毛乳头细胞,绘制了F4代细胞生长曲线,并对F7代细胞进行染色体检查,发现81.3%的细胞染色体核型保持正常的倍数(2n=60)。采用去除外周结缔组织鞘的毛囊,进行分段或未分段贴壁培养,在毛囊毛球上方区域分离得到毛囊干细胞。毛囊干细胞呈圆形或多边形,核大,核仁明显,细胞器少,细胞呈克隆生长,慢周期性,具有无限的增殖能力。经流氏细胞术检测,F2代G0/G1期细胞百分率为73.98%±4.74%,证明为毛囊干细胞。