不同培养条件下胚胎瘦素的表达

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目的:观察不同培养条件下小鼠胚胎培养液中瘦素的分泌情况,分析培养条件对胚胎的影响。应用小鼠移植模型观察胚胎自分泌瘦素水平及形态学评分与着床及妊娠的关系,探讨瘦素水平对胚胎质量及其种植潜能的预测价值。方法:将小鼠2-细胞期胚胎在三种不同培养条件下分别培养至4-细胞期、8-细胞期、桑葚胚及囊胚期:(1)单纯序贯培养组;(2)共培养组-序贯培养组;(3)体内发育组。将发育的同期胚胎(2-细胞期、4-细胞期、8-细胞期、桑葚胚及囊胚期)分别在50ul微滴中培养6小时,移出胚胎后收集微滴。应用ELISA法测定瘦素分泌情况。囊胚供移植用,11日后观察其受孕情况,比较瘦素水平与形态学评分对胚胎着床能力的预测效果。结果:1、共培养-序贯培养组8-细胞期之后胚胎的发育速度、囊胚形成率均高于单纯序贯培养组(P<0.05)。2、三组桑葚胚之前的培养微滴中均未检测到瘦素的分泌,但在桑葚胚及囊胚5胚/滴的培养微滴中可检测到。其中体内发育组明显高于单纯序贯培养组和共培养-序贯培养组(P<0.05),后两组之间无显著性差异(P>0.05)。3、形态学上评分相同的胚胎瘦素高分泌组着床率明显高于低分泌组(P<0.01);瘦素高分泌的3BB组囊胚着床率高于低分泌的3AA组囊胚(P<0.05)。结论:1.共培养-序贯培养组较单纯序贯培养组有更高的囊胚形成率,共培养-序贯培养对胚胎发育的促进作用在8-细胞期胚以后更明显。2.胚胎在桑葚胚以后分泌瘦素增多,囊胚期胚胎分泌量明显增加,且分泌量的高低与胚胎活力有关,可反映胚胎的成熟度和质量。3、胚胎自分泌瘦素对胚胎种植潜能有预测价值,特别是在形态学上评分相同胚胎的选择上。瘦素对胚胎种植潜能的预测价值可能优于形态学评分,结合瘦素检测和形态学评分来综合判断胚胎着床能力将更有价值。
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