三株不同海洋环境来源微生物胞外多糖的结构研究

来源 :中国海洋大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:libra163
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海洋微生物是重要的海洋生物资源。由于海洋微生物生活在海洋高盐、高压、低温缺氧、光照不足和寡营养的水体环境中,使得海洋微生物多糖在结构和活性方面与来源于陆生生物中的多糖有着显著的差异。本文从三株来源不同的海洋微生物的发酵液中提取得到粗品胞外多糖,再经分离纯化得到纯品多糖,并对得到的多糖组分进行化学组成和结构的研究。研究结果如下:].从西沙海绵共附生真菌Aspergillus versicolor.fj-112的发酵液中提取得到胞外多糖粗品LC,经Q-Sepharose Fast Flow阴离子交换柱分级得到多糖LC-1和LC-2,利用Sephacryl S-100凝胶渗透层析柱对LC-1和LC-2进一步的分离纯化得到两个多糖组分LC-1-p和LC-2-p。高效凝胶渗透色谱分析表明,LC-1-p呈单一对称峰,纯度高,分子量为5 kDa。PMP柱前衍生高效液相色谱分析表明,LC-1-p是由Man和Gal组成,比例为14:2。经红外光谱、甲基化分析和核磁共振波谱分析表明,LC-1-p的连接方式以→2)Manp(1→为主,还含有→1)Galp(4→、 →1)Manp(6→和→2,3)Manp(1→连接方式,说明LC-1-p是一种具有分支结构的半乳甘露聚糖。2.从西沙海绵来源的放线菌Streptomyces sp.HDN-10-293的发酵液中提取得到胞外多糖粗品LD,利用Q-Sepharose Fast Flow离子交换柱层析和SephacrylS-100凝胶渗透柱层析进一步的分离纯化得到多糖组分LD-2-p。高效凝胶渗透色谱分析表明,LD-2-p呈单一对称峰,纯度高,分子量是13 kDa.PMP柱前衍生高效液相色谱分析表明,LD-2-p主要由Gal组成,含有微量的Glc。经红外光谱、甲基化分析和核磁共振分析表明,该多糖主要连接方式是→3)Galp(1→,还有少量的Galp(1→和→6)Glcp(1→连接方式,说明LD-2-p是一种线性葡萄半乳聚糖。3.印度洋的真菌Aspergillus sp. ZZZ-115的发酵液,经浓缩、透析、醇沉等处理后,得到微生物胞外粗多糖LG,其得率为0.gg/L。利用Q-Sepharose Fast Flow离子交换柱层析和Sephacryl S-100凝胶渗透柱层析对该多糖进一步分离纯化得到两个多糖组分LG-3-D1和LG-3-D2。高效凝胶渗透色谱分析表明,LG-3-D1和LG-3-D2均呈单一对称峰,纯度高,分子量分别为23 kDa和16 kDa。经PMP柱前衍生高效液相色谱分析表明,LG-3-D1和LG-3-D2的单糖组成以及摩尔比非常相似,都是由Man和Gal组成,且比例为1.6:1。经红外光谱和甲基化分析表明,LG-3-D2的连接方式复杂,其主要连接方式是→2)Manp(1→,其余连接方式有Galp(1→、→4)Galp(1→、→6)Manp(1→和→2,3)Manp(1→,说明该多糖有支链结构存在,LG-3-D2是一种具有支链的半乳甘露聚糖。本论文为我国“海洋糖库”的建设提供了结构新颖的海洋微生物多糖,为海洋微生物多糖的研究开发提供了基础数据。
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