【摘 要】
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世界绵羊品种库中现有的近700个品种中,除少数具有产羔率高、性成熟早和常年发情的特点外,绝大多数是年产一胎,每胎单羔的绵羊品种,世界主要绵羊生产国都十分重视绵羊多羔性
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世界绵羊品种库中现有的近700个品种中,除少数具有产羔率高、性成熟早和常年发情的特点外,绝大多数是年产一胎,每胎单羔的绵羊品种,世界主要绵羊生产国都十分重视绵羊多羔性的研究。甲状腺转录因子1(Thyroid transcription factor 1,TTF-1)是一种同源结构域转录因子,属于NKX2家族成员,它在甲状腺、肺、脑和肝脏中表达,并调控组织特异性基因的表达;它对哺乳动物的繁殖性能有潜在的影响。采用分子生物学方法研究控制绵羊多羔性状,是提高绵羊繁殖率的有效途径之一。本试验首先从绵羊血液中提取基因组DNA,设计三对特异性引物SP1/SP2、SP3/SP4和SP5 /SP6,采用PCR扩增TTF-1基因目的序列,通过感受态DH5α的转染、质粒DNA的提取、限制性酶切以及测序分析后,GenBank提交序列得到登录号:FJ177515,长度为2972bp,包括全部编码区,内含子及5’、3’端部分序列。序列同源性分析表明,绵羊TTF-1基因的核酸和蛋白质序列在不同哺乳动物之间有很高的同源性,分子在进化上均相当保守;设计特异性引物SP7/SP8,通过RT-PCR方法从动物组织扩增目的片段,经过大量的实验证明TTF-1基因不仅在甲状腺、肺、脑部有表达,在肾脏,肝脏也有,只是存在表达量多少的问题,但在脾脏,卵巢和子宫未发现;最后对TTF-1基因部分序列的多态性进行预测,采用引物SP3/SP4扩增发现,在第一外显子和第二外显子前166bp处的编码区没有突变,但在内含子的111bp(G-A),525bp(A-G),540bp(A-G),737bp(G-A)的4个位点有碱基突变。
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