艾灸对溃疡性结肠炎模型小鼠的血浆HPLC-MS代谢组学研究

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目的:研究艾灸对DSS诱导的溃疡性结肠炎(UC)小鼠模型的治疗效应,及对UC小鼠的免疫因子IL-2、IL-17A的影响,并从代谢组学角度分析艾灸对UC模型小鼠血浆代谢物的影响。初步探索艾灸治疗UC小鼠的代谢机制,为临床针灸治疗UC提供实验依据。方法:将24只清洁级雄性昆明小鼠连续饮用3%葡聚硫酸钠(DSS)溶液诱导小鼠UC疾病发生,模型成功后随机分成UC模型组和艾灸治疗组,另设10只年龄体重相当的小鼠为空白对照组。艾灸治疗组从造模第5天开始取“足三里、关元”穴行艾灸治疗,连续治疗5天。各组小鼠记录疾病活动指数评分(DAI)、光学显微镜及透射电镜观察结肠组织形态,ELISA法检测血液中IL-2、IL-17A的含量,高效液相色谱-质谱联用(HPLC-MS)方法分析小鼠血液代谢物差异性,比较艾灸治疗对UC小鼠血浆代谢物的影响。结果:1、一般疗效观察:(1)一般情况:空白组小鼠精神好,毛发光亮,大便正常。造模后逐渐出现懒动少食,毛色暗淡,体重下降及粪便质稀、隐血阳性。治疗后精神好转,毛发稍有光泽,粪便质松软、隐血(弱)阳性或消失。(2)疾病活动指数(DAI)评分:造模后,造模组DAI指数评分升高。治疗后,艾灸组DAI指数降低,与模型组相比差异有统计学意义(P<0.05)。(3)结肠组织形态学变化:光镜下模型组结肠黏膜组织结构不完整,腺体消失,杯状细胞增多,溃疡面及坏死灶形成,大量炎细胞浸润;艾灸治疗组部分腺体受破坏,黏膜轻度水肿,少量炎细胞浸润。电镜下模型组微绒毛少而短、细胞内大量空泡,线粒体肿胀;艾灸治疗后微绒较完整,线粒体肿胀减轻;空白组结肠组织形态正常。2、免疫效应结果:造模后,模型组与空白组相比血液中IL-2含量明显降低,而IL-17A含量较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。艾灸治疗后,与模型组相比艾灸组IL-2明显升高,而IL-17A则减低,差异均有统计学意义(P<0.05)。3、艾灸对UC小鼠血液代谢物影响:甘油二酯、肉碱、氟尿嘧啶、丁酰胆碱酯酶、尿酸为主要差异代谢产物。其与脂肪酸、氨基酸代谢等能量代谢通路相关。结论:艾灸对UC模型小鼠有治疗效果,能改善IL-2、IL-17A免疫细胞因子。艾灸能对改善UC模型小鼠血液代谢物甘油二酯、肉碱、氟尿嘧啶、丁酰胆碱酯酶、尿酸等的紊乱,提示艾灸可能对这些代谢产物相关能量代谢通路有影响。
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