四川土荆芥次生代谢物抑菌效应的初步研究

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土荆芥(Chenopodium ambrosioides L.)为藜科(Chenopodiaceae)藜属(Chenopodium)的一年生或多年生草本。原产于热带美洲,目前广泛分布于我国的大部分地区,是我国常见的入侵植物之一。研究土荆芥次生代谢物抑菌效应和抑菌机理对于控制土荆芥的蔓延和开发利用具有重要的意义。以玉米纹枯病菌(Rhizoctonia solani Kuha.)、玉米弯胞病菌[Curvularia lunata(walk)Boed]、水稻稻瘟病菌(Pyricularia oryzae Cav.)、小麦赤霉病菌[Gibberelle zeae(Schw.)Petch.]和松赤枯病菌(Pestalotia funerea)5种植物病原真菌为受体菌种,研究了不同浓度和不同处理时间四川土荆芥精油、总黄酮和生物总碱3种次生代谢物的抑菌效应。结果表明:熏蒸试验表明,精油用量为1μL,土荆芥精油对松赤枯病菌、水稻稻瘟病菌、玉米纹枯病菌和玉米弯胞病菌具有促进作用,而高浓度时对菌丝生长具有抑制作用;土荆芥精油培养基给药时,土荆芥精油对5种植物病原真菌均具有抑制作用,IC50分别为:0.734μL·mL-1,0.342μL·mL-1,0.435μL·mL-1,0.370μL·mL-1和0.332μL·mL-1;土荆芥总黄酮培养基给药时,对玉米纹枯病菌菌丝生长具有抑制作用,对玉米弯胞病菌菌丝生长具有促进作用,不同的浓度和不同的处理时间对水稻稻瘟病菌、小麦赤霉病菌和松赤枯病菌菌丝生长具有不同的促进或抑制作用;土荆芥生物总碱培养基给药时,对玉米纹枯病菌和水稻稻瘟病菌菌丝生长具有抑制作用,不同的浓度和不同的处理时间对玉米弯胞病菌、小麦赤霉病菌和松赤枯病菌菌丝生长具有抑制或促进作用。用半抑制浓度的土荆芥精油、10 mg·mL-1的土荆芥总黄酮和5 mg·mL-1的土荆芥生物总碱分别处理玉米纹枯病菌、玉米弯胞病菌、水稻稻瘟病菌、小麦赤霉病菌和松赤枯病菌,采用显微观察、SDS-PAGE电泳法和琼脂糖凝胶电泳法,分别研究了四川土荆芥精油、总黄酮和生物总碱对5种植物病原真菌形态结构、菌丝蛋白和DNA的影响。结果表明:分别用土荆芥次生代谢物处理24 h,48 h和72 h后,5种植物病原真菌的菌丝原生质均发生一定程度的聚集,菌丝结构遭到一定的破坏,但菌丝DNA条带均无变化,除了在总黄酮和生物总碱处理的水稻稻瘟病菌菌丝蛋白条带无变化,其余处理各菌种菌丝蛋白条带在相应的处理时间段出现消失或增加。植物病原真菌在土荆芥次生代谢物处理之后出现原有蛋白质彻底消失,表明土荆芥次生代谢物对真菌具有不可逆行损伤;而处理之后出现蛋白质的增加,或者处理前期消失,随着处理时间的延长而又重新出现,表明植物病原真菌对土荆芥精油具有一定的拮抗作用。
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