论文部分内容阅读
植物雄性不育是植物界普遍存在的现象，它是利用杂种优势生产杂交种的基础，可以省去人工去雄，达到降低成本的目的。到目前为止，大豆已选育十几个不同且育性稳定的质核互作雄性不育系，并已初步实现利用杂种优势获得大豆产量上的突破，但对大豆细胞质雄性不育分子机理的研究还是较少。为此，本文以62对大豆细胞质雄性不育系及相应保持系为材料，采用RAPD分子标记技术对mtDNA基因组进行标记和多态性分析，并对获得的部分不育系和保持系特异谱带进行测序分析。
主要研究结果如下：
1．设置5个蔗糖梯度(30％，35％，40％，45％，50％)再经两次超速离心(35000rpm)分离线粒体可以保证分离到线粒体DNA的纯度，从而确保线粒体DNA的提取质量。
2．OPA-03、OPD-20、OPE-01、OPG-17、OPH-18、OPK-07、OPM-06、OPP-15、OPQ-12、OPQ-13、OPR-03等11个引物在保持系中扩增出特异产物，OPD-02、OPL-13、OPN-03等3个引物在不育系中扩增出特异产物，OPB-06、OPI-09、OPL-10等3个引物在保持系和不育系上均扩增出特异产物，但片段大小不同。这些特异的存在可能与大豆细胞质雄性不育的产生有关。
3．对上述扩增获得的部分目的片段(8个)进行了测序，除OPN-03扩增的特异片段为未知序列外，其它7个扩增的特异序列均与植物线粒体基因组都具有较高的同源性。这也进一步说明我们提取的线粒体DNA纯度较高。
4．引物OPA-03扩增的特异序列有71bp与拟南芥线粒体基因组中靠近cox1基因编码区上游一段序列相匹配，同源性达98％。由此推断，大豆细胞质雄性不育可能与Cox I基因有关。