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目的: 观察艾灸治疗实验性自身免疫性甲状腺炎(experimental autoimmune thyroiditis,EAT)大鼠的效应,以及艾灸对EAT大鼠炎性细胞因子IL-17、IL-23、IL-23R蛋白含量和mRNA表达水平的影响,拟阐释艾灸治疗EAT的作用机制。 方法: 将体重为100±20 g的雌性SD大鼠随机分成正常大鼠和造模大鼠。造模大鼠采用碘剂和猪甲状腺球蛋白联合免疫的方法建立EAT动物模型,造模结束并鉴定模型成功之后将造模大鼠随机分为4组:模型组、优甲乐组、隔附子饼灸组和温和灸组。隔附子饼灸组和温和灸组分别采用隔附子饼灸和温和灸,选择“大椎、命门”和“天突、关元”2组穴位,每日取1组穴位,交替轮流施灸,每天1次,隔附子灸每次2壮、温和灸10分钟;优甲乐组用优甲乐悬浊液(1μg/2ml)灌胃,每只2.25μg/(kg·d)。治疗30天后,采集大鼠腹主动脉血和甲状腺组织,光镜下观察各组甲状腺组织形态学变化;用ELISA法检测血清中甲状腺自身抗体抗甲状腺球蛋白抗体(Thyroglobulin autoantibodies,TGAb)、抗甲状腺过氧化物酶抗体(Thyroperoxidase autoantibodies,TPOAb)浓度以及IL-17、IL-23和IL-23R蛋白含量;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测甲状腺组中IL-17、IL-23和IL-23RmRNA的表达;对上述蛋白含量、基因的表达水平和TGAb、TPOAb的浓度进行相关性分析。 结果: 1.甲状腺组织形态学:正常组:大鼠甲状腺滤泡呈圆形或椭圆形,大小适中,滤泡上皮细胞呈低柱状,滤泡腔内充满胶质,未见淋巴细胞浸润。模型组:可见大量甲状腺滤泡破坏,大量淋巴细胞浸润,间质大量纤维组织增生。优甲乐组:部分甲状腺滤泡破坏,少量淋巴细胞浸润,少量纤维组织增生。隔附子饼灸组:少量甲状腺滤泡破坏、消失,间质少量淋巴细胞浸润,少量纤维组织增生。温和灸组大鼠:少量滤泡破坏,少量淋巴细胞浸润,少量纤维组织增生。经统计学分析发现,隔附子饼灸、温和灸均能改善甲状腺组织滤泡破坏和淋巴细胞浸润程度,差异有统计学意义(P<0.05)。 2.甲状腺功能:与正常组比较,模型组大鼠血清FT3下降,TSH升高;与模型组比较,隔附子饼灸组、优甲乐组大鼠血清FT3升高,TSH降低,差异有统计学意义(P均<0.01);与模型组比较,温和灸组大鼠TSH降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与优甲乐组比较,隔附子饼灸组大鼠血清TSH降低,差异有统计学意义(P<0.01)。 3.甲状腺自身抗体:与正常组比较,模型组大鼠血清中TGAb、TPOAb的浓度升高;与模型组比较,隔附子饼灸组、温和灸组大鼠血清中TGAb、TPOAb浓度降低,差异有统计学意义(P<0.05);优甲乐组大鼠TPOAb浓度降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与优甲乐组比较,隔附子饼灸组大鼠血清中TPOAb浓度降低,差异有统计学意义(P<0.05)。 4.艾灸对EAT大鼠炎性细胞因子IL-17、IL-23、IL-23R的影响:与正常组比较:模型组大鼠血清中IL-17、IL-23和IL-23R蛋白含量升高,甲状腺组织中IL-17、IL-23和IL-23R mRNA的表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,优甲乐组大鼠血清中IL-23R蛋白含量降低,差异有统计学意义(P<0.05);隔附子饼灸组大鼠血清中IL-17、IL-23和IL-23R蛋白含量降低,甲状腺组织中IL-17、IL-23和IL-23R mRNA表达下降,差异有统计学意义(P<0.05);温和灸组大鼠血清中IL-17、IL-23蛋白含量浓度降低,差异有统计学意义(P<0.05)。 5.炎性细胞因子IL-17、IL-23、IL-23R和TGAb、TPOAb的相关性分析:血清中IL-17、IL-23蛋白含量,甲状腺组织中IL-17、IL-23、IL-23R mRNA的表达水平和血清中TGAb的浓度呈正相关关系(r值分别为0.634、0.511、0.609、0.44、0.427)。血清中IL-17、IL-23、IL-23R蛋白含量,甲状腺组织中IL-17 mRNA的表达水平与血清中TPOAb的浓度呈正相关关系(r值分别为0.415、0.474、0.355、0.441)。 结论: 1.隔附子饼灸、温和灸均能有效改善EAT大鼠甲状腺组织形态。 2.隔附子饼灸、温和灸均可改善EAT大鼠甲状腺功能。隔附子饼灸能升高EAT大鼠FT3水平、降低TSH水平,温和灸仅能降低TSH水平。 3.隔附子饼灸、温和灸均能降低EAT大鼠TGAb、TPOAb水平,有效干预EAT。 4.隔附子饼灸、温和灸均可降低EAT大鼠炎性细胞因子IL-17、IL-23、IL-23R蛋白含量及mRNA的表达水平,减轻甲状腺的炎症反应。