艾灸对实验性自身免疫性甲状腺炎大鼠的效应观察及其对炎性细胞因子影响的研究

来源 :上海中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lliiuuffuuyyaann
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目的:  观察艾灸治疗实验性自身免疫性甲状腺炎(experimental autoimmune thyroiditis,EAT)大鼠的效应,以及艾灸对EAT大鼠炎性细胞因子IL-17、IL-23、IL-23R蛋白含量和mRNA表达水平的影响,拟阐释艾灸治疗EAT的作用机制。  方法:  将体重为100±20 g的雌性SD大鼠随机分成正常大鼠和造模大鼠。造模大鼠采用碘剂和猪甲状腺球蛋白联合免疫的方法建立EAT动物模型,造模结束并鉴定模型成功之后将造模大鼠随机分为4组:模型组、优甲乐组、隔附子饼灸组和温和灸组。隔附子饼灸组和温和灸组分别采用隔附子饼灸和温和灸,选择“大椎、命门”和“天突、关元”2组穴位,每日取1组穴位,交替轮流施灸,每天1次,隔附子灸每次2壮、温和灸10分钟;优甲乐组用优甲乐悬浊液(1μg/2ml)灌胃,每只2.25μg/(kg·d)。治疗30天后,采集大鼠腹主动脉血和甲状腺组织,光镜下观察各组甲状腺组织形态学变化;用ELISA法检测血清中甲状腺自身抗体抗甲状腺球蛋白抗体(Thyroglobulin autoantibodies,TGAb)、抗甲状腺过氧化物酶抗体(Thyroperoxidase autoantibodies,TPOAb)浓度以及IL-17、IL-23和IL-23R蛋白含量;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测甲状腺组中IL-17、IL-23和IL-23RmRNA的表达;对上述蛋白含量、基因的表达水平和TGAb、TPOAb的浓度进行相关性分析。  结果:  1.甲状腺组织形态学:正常组:大鼠甲状腺滤泡呈圆形或椭圆形,大小适中,滤泡上皮细胞呈低柱状,滤泡腔内充满胶质,未见淋巴细胞浸润。模型组:可见大量甲状腺滤泡破坏,大量淋巴细胞浸润,间质大量纤维组织增生。优甲乐组:部分甲状腺滤泡破坏,少量淋巴细胞浸润,少量纤维组织增生。隔附子饼灸组:少量甲状腺滤泡破坏、消失,间质少量淋巴细胞浸润,少量纤维组织增生。温和灸组大鼠:少量滤泡破坏,少量淋巴细胞浸润,少量纤维组织增生。经统计学分析发现,隔附子饼灸、温和灸均能改善甲状腺组织滤泡破坏和淋巴细胞浸润程度,差异有统计学意义(P<0.05)。  2.甲状腺功能:与正常组比较,模型组大鼠血清FT3下降,TSH升高;与模型组比较,隔附子饼灸组、优甲乐组大鼠血清FT3升高,TSH降低,差异有统计学意义(P均<0.01);与模型组比较,温和灸组大鼠TSH降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与优甲乐组比较,隔附子饼灸组大鼠血清TSH降低,差异有统计学意义(P<0.01)。  3.甲状腺自身抗体:与正常组比较,模型组大鼠血清中TGAb、TPOAb的浓度升高;与模型组比较,隔附子饼灸组、温和灸组大鼠血清中TGAb、TPOAb浓度降低,差异有统计学意义(P<0.05);优甲乐组大鼠TPOAb浓度降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与优甲乐组比较,隔附子饼灸组大鼠血清中TPOAb浓度降低,差异有统计学意义(P<0.05)。  4.艾灸对EAT大鼠炎性细胞因子IL-17、IL-23、IL-23R的影响:与正常组比较:模型组大鼠血清中IL-17、IL-23和IL-23R蛋白含量升高,甲状腺组织中IL-17、IL-23和IL-23R mRNA的表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,优甲乐组大鼠血清中IL-23R蛋白含量降低,差异有统计学意义(P<0.05);隔附子饼灸组大鼠血清中IL-17、IL-23和IL-23R蛋白含量降低,甲状腺组织中IL-17、IL-23和IL-23R mRNA表达下降,差异有统计学意义(P<0.05);温和灸组大鼠血清中IL-17、IL-23蛋白含量浓度降低,差异有统计学意义(P<0.05)。  5.炎性细胞因子IL-17、IL-23、IL-23R和TGAb、TPOAb的相关性分析:血清中IL-17、IL-23蛋白含量,甲状腺组织中IL-17、IL-23、IL-23R mRNA的表达水平和血清中TGAb的浓度呈正相关关系(r值分别为0.634、0.511、0.609、0.44、0.427)。血清中IL-17、IL-23、IL-23R蛋白含量,甲状腺组织中IL-17 mRNA的表达水平与血清中TPOAb的浓度呈正相关关系(r值分别为0.415、0.474、0.355、0.441)。  结论:  1.隔附子饼灸、温和灸均能有效改善EAT大鼠甲状腺组织形态。  2.隔附子饼灸、温和灸均可改善EAT大鼠甲状腺功能。隔附子饼灸能升高EAT大鼠FT3水平、降低TSH水平,温和灸仅能降低TSH水平。  3.隔附子饼灸、温和灸均能降低EAT大鼠TGAb、TPOAb水平,有效干预EAT。  4.隔附子饼灸、温和灸均可降低EAT大鼠炎性细胞因子IL-17、IL-23、IL-23R蛋白含量及mRNA的表达水平,减轻甲状腺的炎症反应。
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